همسانه‌سازي ژن hsp70 مايكوباكتريوم اويوم تحت‌گونه پاراتوبركلوزيس در پلاسميد pET-24a و بيان آن در باكتري اشريشيا‌ كولاي

بيماري يون (پاراتوبركلوزيس) ناشي از باكتري مايكوباكتريوم اويوم پاراتوبركلوزيس (Mycobacterium avium paratuberculosis; MAP) عفونت مزمن و پيشرونده اي بوده و به طور عمده نشخواركنندگان را درگير مي سازد. اين بيماري مي تواند خسارات اقتصادي فراواني را به صنعت دامپروري وارد سازد و ممكن است تهديدي نيز براي بهداشت عمومي باشد، چون با انتقال از راه شير و ديگر فراورده هاي دامي آلوده ممكن است انسان را نيز آلوده نمايد. مقاومت و ايمني در برابر بيماري يون، بيش تر به پاسخ ايمني با واسطۀ سلولي مرتبط است. پروتئين شوك حرارتي 70 (heat shock protein70; HSP70) باكتري فوق، يكي از پروتئين هاي مهم آن مي باشد كه پاسخ ضد آن از دفع مدفوعي باكتري جلوگيري مي كند. به‌منظور فراهم سازي توليد واكسن نوتركيب جهت مقابله با بيماري يون، در اين مطالعه توليد HSP نوتركيب (recombinat HSP; rHSP) و بررسي ايمني زايي آن در خرگوش مورد بررسي قرار گرفت. بدين منظور ژن hsp70 در پلاسميد pET-24a همسانه سازي گرديد و پلاسميد نوتركيب حاصله به سويۀ BL21 باكتري اشريشيا كولاي منتقل شد. بيان پروتئين فوق با استفاده از SDS-PAGE بررسي و صحت توالي نوكلئوتيدي با تعيين توالي، تأييد گرديد. تزريق rHSP70 به خرگوش با توليد سطح بالايي از آنتي بادي ضدِّ آن همراه بود. بر اساس يافته ها، به نظر مي رسد كه آنتي بادي ضد rHSP70 را مي توان در طراحي روش هاي تشخيصي بيماري و پروتئين نوتركيب توليدشده را جهت توليد واكسن هاي نوتركيب مورد ارزيابي قرار داد.