پايداري هموپلاسمي و توارث سيتوپلاسمي داربست پروتئيني دارپين G3 در تكثير زايشي و رويشي گياهان ترانسپلاستوم توتون

مهندسي پلاستيد مزاياي بي‌شماري را براي نسل بعدي فناوري تراريختي گياهي به ارمغان مي‌آورد كه شامل تسهيل انباشت تراژن‌ها و توليد سطوح بيان بالاي پروتئين‌هاي نوتركيب مي‌باشد. پروتئين‌هاي تكرار آنكريني طراحي شده (دارپين‌ها) پروتئين‌هاي داربست غيرايمونوگلوبوليني نسبتاً كوچكي هستند كه با تمايل بالا به اهداف اختصاصي خود متصل مي‌شوند. G3 يك نوع دارپين طراحي شده براي اتصال به پروتئين گيرنده تيروزين‌كيناز HER2 (گيرنده 2 فاكتور رشد اپيدرمي انسان) است. در مطالعه قبلي يك فرآيند زيستي براي توليد دارپين G3 به‌عنوان عامل تصويربرداري در سرطان‌هاي با بيان بالاي HER2 در سيستم بيان كلروپلاستي توتون توليد شد. در اين مطالعه، پايداري هموپلاسمي و بيان ژن دارپين G3 در نسل رويشي و زايشي گياهان T1 ترانسپلاستوم توتون مطالعه شد. تأييد حضور ژن دارپين G3 در گياهان ترانسپلاستوم با استفاده از واكنش PCR انجام شد. آناليز لكه‌گذاري سادرن وضعيت هموپلاسمي گياهان ترانسپلاستوم را تأييد كرد. آناليز لكه‌گذاري وسترن تجمع دارپين G3 را در كلروپلاست نسل بعدي گياهان ترانسپلاستوم تأييد كرد. محتوي دارپين G3 توليد شده در كلروپلاست گياهان ترانسپلاستوم با استفاده از الايزا براي پروتئين محلول كل كلروپلاست حدود 33 درصد برآورد شد. نتايج اين مطالعه تأييد كرد كه ژن دارپين G3 در گياهان رويشي و زايشي نسل T1 گياهان توتون ترانسپلاستوم به‌صورت پايدار و در سطوح بالا بيان مي‌شود.