عنوان مقاله :
همسانه سازي ملكولي، بيان و مشخصه يابي راه انداز پاسخ دهنده به تنش خشكي ژن لينالول سنتاز (Lins) در برخي از توده هاي بذري ريحان
پديد آورندگان :
خاكدان ، فاطمه دانشگاه سمنان، پرديس فرزانگان - گروه زيست شناسي , شيرازي ، زهرا سازمان تحقيقات، آموزش و ترويج كشاورزي - موسسه تحقيقات جنگلها و مراتع كشور - بخش تحقيقات زيست فناوري
كليدواژه :
لينالول , تنش خشكي , بيان ژن , راه انداز , عناصر تنظيمي
چكيده فارسي :
ريحان (Ocimum basilicum L.)، گياهي دارويي و معطر كه در طب سنتي در درمان بسياري از بيماريها مورد استفاده قرار ميگيرد. مونوترپنها، سسكوئي ترپنها و فنيل پروپانوئيدها حجم عمده اسانس ريحان را تشكيل ميدهند. بخش قابل توجهي از ترپنوئيدها را تركيب مونوترپن فرار لينالول تشكيل ميدهد كه بهعلت اثرات دفاعي، در مكانيسم تحمل گياه در برابر انواع تنشهاي محيطي بسيار مورد اهميت ميباشد. آنزيم لينالول سنتاز (Lins) آنزيم كليدي در مسير بيوسنتز ترپنوئيدها، تبديل پيشماده اصلي مونوترپنها (GPP) را به تركيب نهايي لينالول را انجام ميدهد. در تحقيق حاضر، براي بررسي تاثير تنش خشكي بر شكلگيري و كنترل تنظيم نسخهبرداري بر مسير بيوسنتز تركيب لينالول در سه توده دارويي ريحان، پروفيل بيان نسبي ژن كليدي ObLins در مسير بيوسنتز لينالول در شرايط شاهد (100 درصد ظرفيت زراعي) و سه سطح تنش خشكي (1W: 75، 2W: 50 و 3W: 25 درصد ظرفيت زراعي)، با استفاده از واكنش زنجيرهاي پليمراز در زمان واقعي (qRT-PCR) بررسي شد. بهمنظور مطالعه نحوه تنظيم الگوي بيان ژن ObLins در شرايط تنش خشكي، جداسازي، مشخصهيابي، آناليز عملكردي راهانداز pObLins نيز انجام گرفت. نتايج نشان داد، در راهانداز اين ژن، عناصر تنظيمي پاسخدهنده به تنش خشكي شامل MBS، MYB-site، WRKY710S، W-Box،CCAAT-Box ،DRE2 و CBFHV و محل اتصال فاكتورهاي نسخهبرداري مؤثر در نسخهبرداري ژن ObLins در مواجه با تنش خشكي وجود دارد. بيان موقت ژن گزارشگر GUS تحت كنترل راهانداز pObLins در برگهاي گياه توتون نشان داد كه با حضور cis-elementهاي پايه و جايگاه اتصال فاكتورها و تقويت كنندههاي رونويسي، اين راهانداز قادر به هدايت و بيان پايه اين ژن است. با توجه بهحضور عناصر تنظيمي پاسخدهنده به تنشهاي زيستي و غير زيستي در راهانداز ژن ObLins، انتظار ميرود اين راهانداز قادر به بيان ژن ObLins در پاسخ به تنشهاي محيطي با تنظيم ميزان رونويسي آن باشد.