عنوان مقاله :
ارزيابي اثر هدف‌گيري درون سلولي روي تجمع نانوبادي نوتركيب Anti-VEGF در گياه كدو
پديد آورندگان :
سليماني زاده ، مژگان دانشگاه هرمزگان - دانشكده كشاورزي و منابع طبيعي - گروه علوم و مهندسي باغباني , جلالي جواران ، مختار دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي , باقري ، عبدالرضا دانشگاه فردوسي مشهد - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي و به‌نژادي گياهي , بهداني ، مهدي انستيتوپاستور ايران - مركز تحقيقات بيوتكنولوژي - بخش بيوتكنولوژي، آزمايشگاه ونوم و بيومولكول هاي دارويي
كليدواژه :
پروتئين نوتركيب , رگزايي , زراعت مولكولي , شبكه آندوپلاسمي , هدف‌گيري درون سلولي
چكيده فارسي :
زراعت مولكولي در سه دهه‌ي اخير به‌عنوان يك استراتژي جايگزين و مقرون به‌صرفه براي توليد موفق صدها پروتئين نوتركيب دارويي در مقياس بالا با استفاده از گياهان ظهور كرده است. از آنجا كه سلول‌هاي توموري براي رشد و تهاجم به رگزايي نياز دارند، لذا هدف‌گيري مهمترين فاكتور رگزايي يعني فاكتور رشد اندوتليال عروقي (VEGF) با استفاده از پروتئين نوتركيب دارويي Anti-VEGF بيان شده در گياه مي‌تواند به‌عنوان يك رويكرد موثر براي مهار رگزايي و درمان سرطان عمل نمايد. يكي از مشكلات اصلي براي تجاري‌سازي زراعت مولكولي سطح بيان پايين پروتئين نوتركيب مي‌باشد. بنابراين رويكردهاي متعددي از جمله استفاده از پيش‌برنده‌هاي قوي رونويسي، بهينه‌سازي كدوني توالي پروتئين، هدف‌گيري درون سلولي مناسب و آزمون سيستم‌هاي بياني مختلف مبتني بر گياه براي افزايش بيان پروتئين ايجاد شده است. در اين مقاله، اثر هدف‌گيري آپوپلاستي و شبكه آندوپلاسمي روي تجمع پروتئين نوتركيب Anti-VEGF در گياه كدو بررسي شد. بدين منظور، آناليزهاي مولكولي مختلف (RT-PCR، Dotblot،SDS-PAGE ، Westernblot و ELISA) انجام شد. نتايج نشان داد كه هدف‌گيري به شبكه آندوپلاسمي مي‌تواند منجر به تجمع بالاتر پروتئين نوتركيب (شش برابر) نسبت به آپوپلاست شود. بنابراين شبكه آندوپلاسمي مي‌تواند مكان مناسب‌تري براي بيان پروتئين نوتركيب هدف و ساير پروتئين‌هاي نوتركيب ديگر نسبت به آپوپلاست باشد.
