تاثير عصاره گياه كاليگونوم بر كلوني‌زايي و توليد گونه‌هاي فعال اكسيژن در سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني گوسفند

اين مطالعه به منظور بررسي اثر عصاره كاليگونوم بر تعداد كلوني‌ها، توليد گونه‌هاي فعال اكسيژن و بيان ژن‌هاي مرتبط با آپوپتوزيس در سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني گوسفند انجام شد. در اين پژوهش سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني موجود در غشاء پايه لوله‌هاي مني‌ساز از بيضه گوسفند نژاد افشاري با استفاده از مراحل هضم آنزيمي جداسازي شدند. نمونه‌ها‌ به چهار گروه تقسيم شدند. گروه شاهد شامل محيط پايه بود و در سه گروه بعدي به ترتيب تيمارهاي H2O2 (30 ميكرومولار)، كاليگونوم (10 ميكروگرم در ميلي‌ليتر) و كاليگونوم+H2O2 (30 ميكرومولار H2O2 به همراه 10 ميكروگرم در ميلي‌ليتر كاليگونوم) به محيط پايه اضافه شدند. سلول‌ها به مدت سه هفته كشت داده شدند و ميزان كلونيزاسيون در روزهاي پنج و 14 و 21 پس از شروع كشت ارزيابي شدند. پس از پايان دوره كشت ميزان توليد گونه‌هاي فعال اكسيژن و بيان ژن‌هاي مرتبط با آپوپتوزيس (BAX و BCL2) نيز ارزيابي شد. در روز 5 و 14 كشت، تعداد كلوني‌هاي اسپرماتوگوني در گروه‌هاي شاهد و كاليگونوم نسبت به دو گروه ديگر بيشتر بود (0.05≥P). در روز 21 كشت، بيشترين و كمترين تعداد كلوني‌هاي اسپرماتوگوني به‌ترتيب در گروه‌هاي كاليگونوم و H2O2 مشاهده شد (0.05≥P). كمترين و بيشترين درصد سلول‌هاي اسپرماتوگوني حاوي ROS و همچنين بيان ژن BAX و مقدار نسبت BAX/BCL2 به‌ترتيب در گروه‌هاي كاليگونوم و H2O2 مشاهده شد (0.05≥P). همچنين بيشترين مقدار بيان ژن BCL2 در سلول‌هاي اسپرماتوگوني گروه‌ كاليگونوم مشاهده شد (0.05≥P). در نتيجه استفاده از عصاره كاليگونوم در محيط كشت مي‌تواند راهكاري تاثيرگذار در راستاي بهبود كيفيت و كاهش بروز آپوپتوزيس در سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني گوسفند طي مطالعات تحقيقاتي باشد.