بيان پروتئين Omp25 بروسلا آبورتوس در باكتري پروبيوتيك لاكتوكوكوس لاكتيس

سابقه و هدف: در تمام گونه‌‌هاي باكتري بروسلا، توالي ژن Omp25 حفاظت شده است. خاصيت آنتي ژنيسيته بالاي محصول اين ژن باعث تحريك سيستم ايمني ميزبان مي‌شود. استفاده از باكتري پروبيوتيك مهندسي شده، روش مناسبي براي انتقال واكسن است. اين مطالعه با هدف بيان Omp25 باكتري بيماري‌زاي بروسلا آبورتوس در باكتري پروبيوتيك لاكتوكوكوس لاكتيس، انجام پذيرفت. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، وكتور مورد نظر به همراه ژن و سيگنال پپتيد (pNZ8148-Usp45-Omp25) طراحي و سنتز گرديد. باكتري‌ E. coli سويه TOP10F با وكتور بياني pNZ8148-Usp45-Omp25 مبتني بر القا توسط نيسين ترانسفورم شد. با استفاده از كيت استخراج پلاسميد، از باكتري‌‌هاي ترانسفورم شده پلاسميد نوتركيب استخراج گرديد. ترانسفورماسيون باكتري پروبيوتيك لاكتوكوكوس لاكتيس با وكتور pNZ8148-Usp45-Omp25، توسط روش الكتروپوريشن انجام گرفت. بررسي بيان ژن Omp25 در سطح RNA، به روش رونوشت‌برداري معكوس و تاييد حضور پروتئين نوتركيب Omp25 در باكتري مهندسي شده با روش SDS-PAGE، ارزيابي شد. يافته‌ها: بيان موفقيت‌آميز پروتئين  Omp25بروسلا آبورتوس در باكتري لاكتوكوكوس لاكتيس با RT-PCR تأييد شد. با استفاده از روش سديم دودسيل سولفات- پلي‌آكريل آميد ژل الكتروفورز (SDS-PAGE)، پروتئين‌‌ها براساس وزن مولكولي از يكديگر تفكيك شدند .آناليز بيان پروتئين‌‌ها، بيانOmp25  را به صورت يك باند پروتئيني 25 كيلو دالتوني اضافه در باكتري لاكتوكوكوس لاكتيس ترانسفورم شده با pNZ8148-Usp45-Omp25 در مقايسه با لاكتوكوكوس لاكتيس ترانسفورم شده با pNZ8148 (وكتور فاقد ژن هدف) نشان داد. استنتاج: مطالعه حاضر نشان داد كه پروتئين Omp25 در باكتري‌ پروبيوتيك لاكتوكوكوس لاكتيس ترانسفورم شده توسط الكتروپوريشن با وكتور نوتركيب pNZ8148-Usp45-Omp25 بيان مي‌‌شود. باكتري لاكتوكوكوس لاكتيس ترانسفورم شده، مي‌‌تواند در مطالعات آينده به‌عنوان واكسن زير واحدي خوراكي جهت پيشگيري از بروسلوز، مناسب باشد.