تأثير پودر ميوه پنج‌انگشت بر بيان ژن نشانگرهاي اوويداكت مرغ‌هاي تخمگذار

مقدمه و هدف: فيتواستروژن‌ها، استروژن‌هاي گياهي با عملكرد و ساختار استروژن هستند. استروژن در فرآيند سنتز پروتئين‌هاي سفيده تخم‌مرغ در مجراي اويداكت مرغ نقش مهمي ايفا مي‌كند. گياه پنج‌انگشت يك گياه بومي كشورهاي آسياي ميانه، مركزي، جنوب اروپا و كشورهاي مديترانه است. اين گياه در طب سنتي كاربردهاي متعددي دارد. مطالعات قبلي نشان داده است كه گياه پنج‌انگشت حاوي سطوح بالايي از فيتواستروژن است. فعال‌ترين فيتواستروژن‌ها در پنج‌انگشت شامل آپيژنين، وايتكسين و پندولتين است. تاكنون مطالعه‌اي در مورد اثر فيتواستروژن هاي گياه پنج‌انگشت بر بيان نشانگرهاي ژني اوويداكت (اووآلبومين و اووموئيد) مرغ تخمگذار منتشر نشده است. از اين رو، اين مطالعه به منظور بررسي تأثير ميوه‌هاي گياه پنج‌انگشت بر بيان ژن هاي اووآلبومين و اووموئيد اويداكت مرغ‌هاي تخم گذار انجام شد. مواد و روش ها: تعداد 90 قطعه مرغ تخم گذار لگهورن (Hy-Line, W-36) در چرخه دوم توليد (در سن 72 تا 80 هفتگي) در قالب طرح كاملاً تصادفي با سه تيمار، پنج تكرار و 6 قطعه مرغ در هر تكرار مورد استفاده قرار گرفت. تيمارها شامل سطوح مختلف پودر ميوه پنج‌انگشت شامل سطوح صفر، 1 و 2 درصد پودر ميوه پنج‌انگشت به ازاي هر كيلوگرم جيره بودند. پس از استخراج RNAي كل، كيفيت RNA با استفاده از نانودراپ و الكتروفورز ژل آگارز مورد بررسي قرار گرفت و با استفاده از كيت سيناكلون cDNA سنتز شد. ميزان بيان ژن با استفاده از تكنيك واكنش زنجيره اي پليمراز در زمان واقعي اندازه گيري شد. در اين روش از ژن بتااكتين به عنوان ژن مرجع جهت نرمال نمودن داده‌ها استفاده شد. براي تاييد اختصاصيت هر پرايمر نمودار ذوب آن مورد بررسي قرار گرفت. يافته­ ها: الكتروفورز ژل آگارز محصولات واكنش زنجيره‌اي پليمراز به ترتيب قطعات 60، 133 و 150 جفت باز را براي اووآلبومين، اووموئيد و بتااكتين نشان داد. همه نمودارهاي ذوب داراي يك پيك بودند كه نشان دهنده حداقل دايمر پرايمر و اختصاصيت پرايمرها براي هر ژن بود. نتايج واكنش زنجيره‌اي پليمراز در زمان واقعي نشان داد كه مكمل ‌سازي ميوه‌ پنج‌انگشت در سطوح 1 و 2 به جيره مرغ‌هاي تخمگذار تأثيري بر بيان ژن‌هاي اووآلبومين و اووموئيد مرغ‌ تخمگذار ندارد. نتيجه گيري: انتظار نمي‌رود كه افزودن پودر ميوه‌ پنج‌انگشت به جيره مرغ‌هاي تخمگذار سبب افزايش توليد در مرغ تخمگذار شود. بنابراين افزودن گياه پنج‌انگشت به جيره مرغ هاي تخمگذار پيشنهاد نمي شود.