عنوان مقاله :
اعتبارسنجي MS-PCR و تعيين پيش جهش ژن FMR1 در نارسايي زودرس تخمدان
پديد آورندگان :
افخمي ، فاطمه دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده علوم پزشكي - گروه ژنتيك پزشكي , شهبازي ، شيرين دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده علوم پزشكي - گروه ژنتيك پزشكي , فرزدي ، لعيا دانشگاه علوم پزشكي تبريز - مركز تحقيقات سلامت باروري زنان , عزيزي ، معصومه انستيتو پاستور ايران - بخش پزشكي مولكولي
كليدواژه :
پيش جهش FMR1 , جهش ديناميك , بسط تكرار سه تايي , نارسايي زودرس تخمدان وابسته به ايكس شكننده , واكنش زنجيره اي پليمراز اختصاصي متيلاسيون
چكيده فارسي :
زمينه. نارسايي زودرس تخمدان وابسته به ايكس شكننده از نظر باليني به عنوان نوعي از نارسايي اوليه تخمدان با چرخه هاي قاعدگي نامنظم، افزايش سطح هورمون محرك فوليكول، يائسگي زودرس و ناباروري تعريف شده است. از نظر ژنتيكي عامل آن پيش جهش تكرار CGG ناحيه 5 -ترجمه نشده ژن FMR1 مي باشد. هدف اين مطالعه استاندارد سازي روش هاي مولكولي و مقايسه تعداد تكرار CGG ژن FMR1 در بيماران نارسايي زودرس تخمدان بود. روش كار. پس از اخذ رضايت و خونگيري، DNA ژنومي استخراج و به دو روش دستي و كيت با سديم بي سولفيت تيمار شد. با استفاده از دو جفت پرايمر اختصاصي، DNA متيله شده و DNA غيرمتيله با واكنش زنجيره اي پليمراز اختصاصي متيلاسيون تكثير و محصولات به ترتيب به ترتيب n3+ 108 و n3+ 168 جفت باز بر روي ژل آگارز آشكار شد. پس از ارزيابيهاي باليني 20 بيمار مبتلا به فرم تكگير و 2 خانواده با حداقل دو فرد مبتلا مورد مطالعه قرار گرفتند. يافته ها. متوسط سطح سرمي هورمون محرك فوليكول در موارد تك گير ±UI/L 44/73 85/45 و در موارد خانوادگي UI/L 75/72± 33/61 بود. بررسي هاي سونوگرافيك در موارد تكگير و موارد خانوادگي به ترتيب 80 درصد و 75 درصد تخمدان هاي آتروفيك را گزارش كرد. صحت تيمار بيسوليفيت DNA در هر دو روش دستي و كيت تأييد شد، و تفاوتي بين دو روش مشاهده نشد. نتايج بررسي تعداد تكرارها بر روي ژل آگارز نشان داد دو بيمار در بين موارد تك گير (10 درصد) ناقل الل اينترمدييت FMR1 بودند. هيچ موردي از پيش جهش و يا جهش كامل در موارد تك گير يا خانوادگي مشاهده نشد، و تعداد تكرارها در آن ها بين 15 تا 35 تخمين زده شد. نتيجه گيري. به دليل نقش ژن FMR1 در عملكرد تخمدان، بررسي آن از اهميت برخوردار است استانداردسازي يك روش تشخيص مولكولي سريع و مقرون به صرفه از اولويت ها در اين زمينه مي باشد. پيامدهاي عملي. تعيين تكرار CGG ناحيه 5 -ترجمه نشده ژن FMR1 و شناسايي پيش جهش هايي كه ممكن است گسترش يافته و منجر به سندرم ايكس شكننده شوند در ميان زنان جوان امكان مشاوره ژنتيكي لازم براي برنامه ريزي زندگي باروري را فراهم مي كند.
عنوان نشريه :
مجله پزشكي- دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي درماني تبريز
عنوان نشريه :
مجله پزشكي- دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي درماني تبريز