ارزيابي محاسباتي، طراحي و بيان آنتي‌بادي هيبريد به فرم تك زنجيره(scFv) Single Chain Fragment Antibody براي شناسايي پروتئين سطحي Factor H binding Protein (fHbp) باكتري نايسريا مننژيتيديس

سابقه و هدف: فاكتور بيماري زاي پروتيين متصل شونده به فاكتور H (fHbp) نقش حياتي در بقاي پاتوژن در ميزبان دارد. آنتي بادي هاي تك زنجيره به فرم scFv كاربردهاي درماني و تشخيصي دارند. هدف از انجام اين مطالعه، استفاده از روش هاي محاسباتي، طراحي، بيان و بررسي قدرت اتصال آنتي بادي تك زنجيره هيبريدي براي شناسايي باكتري نايسريامننژيتيديس، عامل بيماري مننگوكوك، بود. روش بررسي: در اين تحقيق با انجام يك سري ارزيابي هاي محاسباتي (مدلسازي آنتي ژن، آنتي بادي و داكينگ آنتي ژن-آنتي بادي)، آنتي بادي هيبريدي با قدرت اتصال بالا به پروتيين fHbp طراحي شد. سازه ژني آن در وكتور بياني pET28a (+) سنتز شد و پس از بيان در باكتري BL21 و خالص سازي با استفاده از رزين Ni-NTA، ميل اتصال آن با پروتيين fHbp با استفاده از روش الايزا بررسي شد. يافته ها: فرم هيبريدي (VH1-VL2) با استفاده از ارزيابي هاي محاسباتي انتخاب شد. بيان سازه طراحي شده با استفاده از SDS-PAGE و وسترن بلاتينگ تاييد شد. پس از خالص سازي آنتي بادي و آنتي ژن fHbp، در بررسي هاي الايزا، ميل اتصال اين فرم هيبريدي scFv M-10^9 ×7/6 محاسبه شد. نتيجه گيري: ميل اتصال مناسب فرم هيبريدي آنتي بادي نشان مي دهد كه با استفاده از روش هاي مهندسي آنتي بادي و روش هاي محاسباتي، مي توان به اشكال ديگري از آنتي بادي هاي تك زنجيره دست يافت كه براي اهداف درماني و تشخيصي كاربرد دارند.