خالص سازي و محلول‌سازي همزمان جسم‌توده‌اي MO-CBP2 با استفاده از شيب اوره

امروزه بيان هترولوگ پروتئين‌ها نقشي كليدي در بيوتكنولوژي و صنعت دارد. تشكيل اجسام توده‌اي در بيان هترولوگ پروتئين‌ها، به خصوص بيان پروتئين‌هاي يوكاريوتي در ميزبان‌هاي پروكاريوت كه معروف‌ترين آن‌ها E. coli است؛ يكي از پردردسر‌ترين چالش‌ها براي محققان مي باشد. تشكيل جسم توده‌اي اغلب به دليل بيان بالا، پيوند‌هاي دي‌سولفيدي، بار و يا كانفورماسيون خاص پروتئين است. اجسام توده‌اي برخي پروتئين‌ها داراي فعاليت‌اند اما بسياري نيز بايد محلول و مجددا سرشته شوند تا فعاليت خود را به دست آورند. روش‌هاي سرشته كردن مجدد پروتئين اغلب نه تنها روش‌هاي چند مرحله‌اي و زمان‌برند بلكه بازده‌ي كمي نيز دارند. در اين مطالعه، براي اولين بار پروتئين MO-CBP2 از گياه گرمسيري مورينگا اوليفرا به صورت هترولوگ بيان شد اما در باكتري E. coli تشكيل جسم توده‌اي داد. روش‌هاي مختلفي براي جلوگيري از تشكيل جسم توده‌اي و يا سرشته كردن اين پروتئين به كار گرفته شد كه يكي از كارآمد ترين آن‌ها استفاده از كروماتوگرافي تمايلي ستون نيكل سفارز به همراه شيب غلظت اوره 8-0 مولار بود كه با بازده‌ي زياد، موجب خالص سازي و سرشته شدن مجدد همزمان اين پروتئين در مراحل كمتر شد. اين روش كه در آن مي‌توان پروتئين مورد نظر را تا حدود زيادي خالص و محلول كرد مي‌تواند به عنوان روشي مناسب و كارآمد پيشنهاد ‌شود.