بررسي تغييرات پس از ترجمه هيستون‌ها، سطح متيلاسيون DNA و پروتئين ERβ در سلول‌هاي كومولوس زنان نابارور مبتلا به اندومتريوز

زمينه و هدف: در بين عوامل مهم تأثيرگذار در ناباروري زنان، اندومتريوز(با ميزان شيوع تا 50 درصد در زنان نابارور) از جايگاه ويژه‌اي برخوردار است. اندومتريوز كه به صورت حضور غدد و استروماي اندومتر خارج از بافت رحم شناخته مي شود، باعث طيف وسيعي از اختلالات عملكردي در روند تكامل فوليكولي و تغيير در ريزمحيط فوليكولي مي‌شود كه در نهايت منجر به ايجاد تخمكي مي گردد كه از كيفيت مناسب جهت تشكيل جنين برخوردار نيست. لذا هدف از اين مطالعه تعيين و بررسي تغييرات پس از ترجمه هيستون‌ها، سطح متيلاسيون DNA و ميزان پروتئين ERβ در ژنوم سلول‌هاي كومولوس زنان نابارور مبتلا به اندومتريوز بود. روش بررسي: اين مطالعه، يك مطالعه موردـ شاهدي مي‌باشد كه در سال 1394 در كلينيك درمان ناباروري پژوهشگاه رويان انجام شد. تعداد 24 بيمار در دو گروه  مساوي تقسيم بندي شدند. سلول هاي كومولوس از 12 بيمار نابارور مبتلا به اندومتريوز و 12 خانم كه علت ناباروري آنها فاكتور مردانه بود(به عنوان گروه كنترل ) و تحت پروتكل هاي تحريك تخمك گذاري جهت تزريق درون سيتوپلاسمي اسپرم بودند، گرفته شد. استخراج كروماتين از سلول هاي كومولوس پس از تثبيت اتصال پروتئين هاي متصل به DNA و سپس ليز سلول ها و تهيه كروماتين محلول انجام شد. سطح اتصال و قرارگيري پروتئين MeCP2 (به عنوان مارك متيلاسيون DNA)، دو مارك اپي ژنتيكي مربوط به تغييرات هيستوني( H3K9me2 و H3K9ac) و پروتئين  ERβبه كروماتين سلول هاي كومولوس، با استفاده از آنتي بادي‌هاي اوليه مربوطه، آنتي‌بادي ثانويه كانژوگه و از طريق تكنيك Nucleosome-ELISA بررسي گرديد. داده‌هاي جمع‌آوري شده با استفاده از آزمون‌هاي آماري تي و لون تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: در گروه اندومتريوز، اتصال پروتئين MeCP2 به DNA در سطح معني دار بالاتر از گروه كنترل بود. سطح دو مارك اپي‌ژنتيكي H3K9ac و H3K9me2 در كروماتين سلول‌هاي كومولوس گروه بيمار نسبت به گروه كنترل افزايش معني دار نشان داد(0.05p ). هم‌چنين سطح افزايش يافته اي از اتصال پروتئينERβ به ژنوم بيماران نيز در مقايسه با گروه كنترل مشاهده گرديد.نتيجه‌گيري: تغييرات اپي ژنتيكي از نوع هيپراستيلاسيون و هيپرمتيلاسيون در سطح هيستون ها و هيپرمتيلاسيون DNA كل ژنوم سلول‌هاي كومولوس بيماران نابارور مبتلا به اندومتريوز، همراه با افزايش سطح اتصال پروتئين ERβ رخ داده است.