ارزيابي كارايي آنتي سرم پلي‌كلونال عليه موتيف حفظ شده هماگلوتينين ويروس آنفلوانزا در تشخيص ويروس‌هاي هومولوگ و هترولوگ

زمينه مطالعه: بيماري آنفلوانزاي پرندگان تحت تيپ H9N2 از مهم‌ترين بيماري‌هاي ويروسي ماكيان در كشورهاي آسيايي به شمار مي‌رود. جهش‌هاي متعددي كه در گليكوپروتئين سطحي هماگلوتينين HA به عنوان آنتي‌ژن اصلي ويروس رخ مي‌دهند، تفسير نتايج آزمايش‌هاي سرولوژي برپايه HA را با مشكل مواجه مي‌كنند.هدف: در مطالعه تجربي حاضر، توانايي آنتي‌بادي پلي‌كلونال عليه موتيف حفاظت شده پروتئين HA در شناسايي جدايه‌هاي هترولوگ H9N2 مورد بررسي قرار گرفت.روش‎كار: بر اساس داده‌هاي بيوانفورماتيك، موتيف حفاظت شده پروتئين HA انتخاب و در ناقل (+)pET-28a بيان شد. براي توليد آنتي سرم پلي‌كلونال، پپتيد نوتركيب با ادجوان روغني مخلوط و به جوجه‌هاي SPF تزريق شد. به طور مشابه آنتي سرم حاصل از ويروس غيرفعال تهيه شد. كارايي آنتي سرم‌ها در آزمايش ممانعت از هماگلوتيناسيون HI متقاطع با ويروس‌هاي H9N2 هومولوگ و هترولوگ مورد ارزيابي قرار گرفت.نتايج: در واكنش با آنتي سرم پلي‌كلونال، ميانگين عيار آنتي‌بادي HI عليه ويروس‌هاي هومولوگ و هترولوگ يكسان و برابر 5 برآورد شد. اين عيار با آنتي سرم ويروس غيرفعال براي ويروس هومولوگ 7 و براي ويروس‌هاي هترولوگ بسيار كمتر برآورد شد. اين اختلاف از نظر آماري معني‌دار بود.نتيجه­گيري نهايي: با ارزيابي‌هاي انجام شده اين آنتي سرم داراي كارايي مناسب در شناسايي جدايه‌هاي متفاوت ويروس H9N2 مي‌باشد و در مقايسه با آنتي سرم معمول با دقت بيشتري آنتي‌ژن‌هاي مختلف يك تحت تيپ را تشخيص مي‌دهد. آنتي سرم پلي‌كلونال حاصل فاقد بازدارنده‏هاي غيراختصاصي مي‌باشد كه ممكن است تفسير يافته‏هاي سرولوژي را با مشكلاتي مواجه نمايد؛ اين نتايج نشان داد آنتي سرم پلي‌كلونال توان شناسايي ويروس‌هاي H9N2 جدا شده در سال‌هاي مختلف با آزمايش HI را دارد، هرچند معتبرسازي آن مستلزم انجام آزمايش با تعداد بيشتر ويروس است.