شماره ركورد
1357642
عنوان مقاله
بيان پري پلاسميك يك ديابادي جديد براي هدف قرار دادن همزمان دو نقطهي وارسي سيستم ايمني PD-1 و CTLA-4
پديد آورندگان
بهزادي ، مهسا دانشگاه علوم پزشكي اصفهان - دانشكدهي داروسازي - گروه بيوتكنولوژي دارويي , اكبري ، وجيهه دانشگاه علوم پزشكي اصفهان - دانشكدهي داروسازي - گروه بيوتكنولوژي دارويي
از صفحه
736
تا صفحه
742
كليدواژه
آنتيبادي , ايپيليمومب , پري پلاسم , پروتئينهاي نقاط وارسي ايمني , نيولومب
چكيده فارسي
مقدمه: مطالعات باليني نشان داده است كه مصرف همزمان دو مهاركنندهي مختلف نقاط وارسي ايمني، نيولومب و ايپيليمومب، به صورت معنيداري ايمني و كارآيي درماني بهتري در مقايسه با مصرف هر كدام به تنهايي داشته است. دياباديها آنتيباديهاي مهندسي شده با اختصاصيت دوگانه هستند كه همزمان دو آنتيژن مختلف را مورد هدف قرار ميدهند و ميتوان آنها را در سيستم بيان باكتريايي توليد كرد. هدف مطالعهي حاضر، توليد يك ديابادي جديد براي هدف قرار دادن همزمان دو نقطهي وارسي سيستم ايمني در فضاي پري پلاسم باكتري اشرشيا كولاي بود. روشها: توالي آمينو اسيد ديابادي بر اساس نواحي متغير آنتيباديهاي نيولومب و ايپيليمومب طراحي شد و كد ژنتيكي آن براي بيان در سيستم باكتري بهينهسازي و بعد از ساخت شيميايي در پلاسميد، pET-22b وارد گرديد. بيان پروتئين در باكتري اي كولاي BL21 (DE3) در دماها و غلظتهاي مختلف القاگر انجام شد. بعد از استخراج پروتئين پري پلاسميك، خالصسازي ديابادي با استفاده از كروماتوگرافي تمايلي نيكل انجام گرديد. يافتهها: نتايج SDS-PAGE بيان پروتئين با وزن حدود 55 كيلودالتون را تأييد كرد. بيشترين ميزان پروتئين محلول در دماي 23 درجهي سانتيگراد و غلظت 1 ميليمولار القاگر (IPTG) حاصل شد. پروتئين محلول بيان شده توسط كروماتوكرافي تمايلي با خلوص بالاي 90 درصد با موفقيت خالصسازي شد. نتيجهگيري: نتايج مطالعهي ما نشان داد كه بهينهسازي شرايط بيان، ميتواند منجر به بهبود بيان محلول پروتئينهاي مشابه در فضاي پري پلاسميك شود.
عنوان نشريه
مجله دانشكده پزشكي اصفهان
عنوان نشريه
مجله دانشكده پزشكي اصفهان
لينک به اين مدرک