توليد و بهينه سازي پلي‌هيدروكسي آلكانوات (poly (3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate)) بوسيله جدايه Aeromonas sp. EBA118 جدا شده از خاك به روش تك متغيره

در اين پژوهش با هدف جداسازي ‌باكتري‌هاي بومي توليدكننده‌ي پلي‌هيدروكسي آلكانوات، خاك چندين منطقه كشاورزي اطراف مشهد مورد بررسي قرار گرفت. نمونه‌ها خالص سازي و سپس با استفاده از روش‌هاي رنگ آميزي سودان سياه B و آكريدين اورنج نمونه هاي توليد كننده PHAs جدا شدند. از ميان 31 سويه جداسازي شده 2 گونه به‌عنوان توليدكننده‌ي پلي‌مرهاي پلي‌هيدروكسي آلكانوات شناسايي شدند. جدايه 118EBA با داشتن بيش‌ترين ميزان توليد پلي‌هيدروكسي آلكانوات به عنوان سويه منتخب برگزيده و توليد پلي‌مر در آن بهينه گرديد. به‌منظور افزايش توليد، بهينه‌سازي دومرحله‌اي انجام شد. ابتدا براي افزايش توده سلولي مقادير غلظت منبع نيتروژن و نوع آن، غلظت گلوكز،pH ، دما و ميزان هوادهي در محيط اوليه بهينه‌سازي شدند. در مرحله دوم بهينه‌سازي كه به‌منظور افزايش توليد پلي‌هيدروكسي آلكانوات انجام شد از محيط ثانويه‌ كه داراي مقادير بيشتري از گلوكز بود استفاده شد. در اين تحقيق فاكتورهاي نسبت كربن به نيتروژن، pH، دما و ميزان هوادهي بهينه و تاثير آن‌ها در توليد پلي‌هيدروكسي آلكانوات بررسي گرديد. عصاره مخمر با غلظت g/l 7، گلوكز با غلظت g/l 5 ، pH=8 ، دماي ºC20 و ميزان هوادهي 75% شرايط حاصل‌شده از بهينه‌سازي مرحله اول بودند؛ در مرحله دوم بهينه‌‌‌سازي كه با هدف افزايش توليد پلي‌مر انجام شد نسبت كربن به نيتروژن با مقدار 3:1، pH=7، دماي ºC 37 و هوادهي 80% به ترتيب به‌عنوان بهترين شرايط انتخاب شدند. نتايج طيف سنجي نشان داد پلي‌مر پلي‌هيدروكسي آلكانوات توليد شده توسط جدايه 118EBA Aeromonas sp. از نوع هموپليمر پلي‌هيدروكسي‌بوتيرات خالص نيست و احتمالا نوعي كوپلي استر PHBHHx است.