ارزيابي مولكولي رونويسي ژن icaA تيمارشده با ريفامپين و عصاره سير در استافيلوكوكوس اورئوس

مقدمه: استافيلوكوكوس اورئوس ازجمله باكتري‌هاي بيماري‌زا در انسان است كه عامل طيف وسيعي از بيماري‌هاست. تشكيل بيوفيلم استافيلوكوكوس اورئوس را در برابر شرايط محيطي نامساعد و سيستم ايمني ميزبان در امان نگه مي‌دارد. ژن‌هايي كه مهم‌ترين مواد تشكيل‌دهندة بيوفيلم را كد مي‌كنند، متعلق به اپرون ica هستند كه يكي از مهم‌ترين آنها ژن icaA است. ريفامپين يك آنتي‌بيوتيك با طيف گسترده است و سير نيز به‌دليل داشتن ماده مؤثره آليسين داراي اثرات ضدميكروبي مطلوبي است. در اين پژوهش، اثر ضدميكروبي عصاره سير در سطح فنوتيپي و مولكولي و تأثير آن بر ميزان بيان ژن بيوفيلم icaA و مقايسة آن با آنتي‌بيوتيك ريفامپين بررسي شد.مواد و روش‏‏ها: يك سوية استاندارد و دو سوية بيماري‌زا از استافيلوكوكوس اورئوس ارزيابي شدند. آزمون‌هاي آنتي‌بيوگرام، حداقل غلظت مهاري و حداقل غلظت كشندگي با آنتي‌بيوتيك ريفامپين و عصاره سير انجام شدند. آزمون فنوتيپي بيوفيلم نيز با ميكروپليت 96 چاهكي انجام شد. پس از استخراج RNA از نمونه‌هاي تيمارشده با ريفامپين و عصاره سير، سنتز cDNA و سپس Real time PCR صورت گرفت و ميزان بيان ژن icaA سنجيده شد.نتايج: آزمون آنتي‌بيوگرام، اثر ضدميكروبي عصاره سير را حداقل دربارة سوية استاندارد و يكي از سويه‌هاي بيماري‌زا به اثبات رساند؛ به‌طوري‌كه اين تأثير در مقايسه با ريفامپين درخور توجه بود. نتايج حداقل غلظت مهاري (MIC) و حداقل غلظت كشندگي (MBC) دربارة هر سه سويه براي ريفامپين و تركيب توأم ريفامپين و گارسين به‌ترتيب 375 و 750 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر تعيين شدند. نتايج Real time PCR نشان دادند در همه سويه‌هاي مطالعه‌شده، عصاره سير و ريفامپين قادر به كاهش بيان ژن icaA هستند و استفاده توأم اين دو ماده به كاهش چشمگير بيان اين ژن منجر شد. دربارة سوية استاندارد، ريفامپين و عصاره سير به‌ترتيب بيان icaA را به 88 درصد و 60 درصد نمونه كنترل كاهش دادند و تركيب اين دو ماده با يكديگر به كاهش حدود 50 درصدي بيان ژن بيوفيلم icaA منجر شد.بحث و نتيجه‏گيري: در يك جمع‌بندي كلي استنباط مي‌شود آنتي‌بيوتيك ريفامپين مي‌تواند بر مهار باكتري‌هاي بيماري‌زايي همچون استافيلوكوكوس اورئوس مؤثر باشد. همچنين عصاره سير در سطح فنوتيپي و در سطح مولكولي مي‌تواند به‌عنوان داروي ضد اين باكتري استفاده شود.