خالص سازي فوزوباكتريوم نوكلئاتوم از پاكت هاي پريودنتال دنداني

فوزوباكتريوم نوكلئاتوم (F. nucleatum) يك باكتري بي‌هوازي و گرم منفي و ازنظر ريخت‌شناسي باسيلي كشيده با انتهاي تيز است كه متعلق به خانوادهBacteroidaceae  است. F. nucleatum فلور طبيعي دهان است؛ اما در برخي بيماري‌ها در ساير اندام‌ها نيز وجود دارد. با توجه به نقش F. nucleatum در ايجاد و توسعه بيماري‌هاي انساني، بررسي ويژگي‌ها و عملكردهاي آن بسيار مهم است. براي انجام چنين مطالعاتي بايد امكان جداسازي باكتري از نمونه‌هاي مختلف وجود داشته باشد؛ اما به‌دليل بي‌هوازي اجباري بودن F. nucleatum، خالص‌سازي و نگهداري طولاني‌مدت باكتري‌ها با مشكلاتي مواجه است. هدف از انجام اين مطالعه دستيابي به روشي بهينه به‌منظور خالص‌سازي F. nucleatum است تا بتوان زمينة مطالعه دقيق عملكردها و مكانيسم‌هاي عمل باكتري به‌منظور ارائه رويكردهاي درماني جديد براي كنترل يا درمان بيماري‌هاي ايجادشده توسط F. nucleatum را براي مطالعات آينده فراهم كرد. با استفاده از paper point با سايز 40 از پاكت‌هاي پريودنتال عميق 16 بيمار با استفاده از محيط انتقالي Tryptic Soy Broth (روش اول) و محيط كشت كلمبيا آگار همراه با گاز پك نوع A و جار بي‌هوازي (روش دوم) نمونه‌گيري انجام شد. سپس نمونه‌ها به‌منظور تأييد حضور F. nucleatum با مشاهدات ماكروسكوپي و ميكروسكوپي، تست‌هاي بيوشيميايي، تست PCR و توالي‌يابي بررسي شدند. نتايج نشان دادند محيط انتقالي Tryptic Soy Broth قادر به حفظ و زنده نگه داشتن باكتري نبوده است و F. nucleatum هاي خالص‌شده با انتقال مستقيم آنها به محيط كشت كلمبيا آگار همراه با گاز پك نوع A و جار بي‌هوازي جداسازي شدند. با توجه به بي‌هوازي اجباري بودن F. nucleatum، استفاده از محيط انتقالي به‌علت مواجهه بيشتر باكتري با اكسيژن هوا براي جداسازي كارآمد نيست و روش بهينه براي خالص‌سازي F. nucleatum دومين روش نمونه‌گيري است.