جداسازي باكتري‌هاي تجزيه‌كننده ليپيد از پساب‌هاي صنعتي و شناسايي مولكولي آنها

زمينه و هدف: ليپازهاي ميكروبي، گروه مهمي از آنزيم هاي باارزش بيوتكنولوژي محسوب مي شوند. در تحقيق حاضر تلاش شد تا سويه‌هاي ميكروبي توليدكننده ليپاز ازنمونه‌هاي پساب‌هاي صنعتي جداسازي و شناسايي شوند.مواد و روش ها: پس ازنمونه‌برداري از فاضلاب و پساب محل‌هاي مختلف، 16 كلوني از اين نمونه‌ها جداسازي شد. جدايه‌ها براي بررسي توانايي توليد آنزيم ليپاز، همراه با يك سويه اكتينوميست به‌عنوان كنترل مثبت، در محيط كشت اختصاصي حاوي تويين80، كشت داده شدند. فعاليت آنزيمي براساس نمودار استاندارد ليپاز، بررسي شد. به‌منظور تشخيص مولكولي جدايه‌ها ريبوتايپينگ انجام شد. بدين منظور، DNA جدايه‌ها با كمك كيت، استخراج شدند و با الكتروفورز و دستگاه نانودراپ ارزيابي گرديد. سپس PCR با كمك پرايمرهاي ژن 16SrRNA صورت گرفته و محصول PCR تعيين توالي شده و با استفاده از بلاست توالي‌ها در پايگاه داده NCBI، سويه‌ها شناسايي شدند.يافته ها: از مجموع 6 جدايه، ده سويه (62/5 درصد) قادر به توليد آنزيم ليپاز و در نتيجه ايجاد هاله شفاف در محيط كشت حاوي ليپيد بودند. از اين ميان، دو جدايه با ميزان تشكيل هاله و منبع جداسازي مشابه كه بيشترين رشد و فعاليت را در 144 ساعت پس از كشت نشان داده بودند، انتخاب شدند. مقادير فعاليت آنزيمي براي باكتري جداشده از پساب كشتارگاه و پساب مكانيكي به‌ترتيب در بازه بين 2/99 تا 22/65 و 3/73 تا39/2 واحد بر ميلي‌ليتر بود.نتيجه‌گيري: باكتري‌هاي آئروموناس وروني و كوپرياويدوس متاليدورانس به دليل فعاليت ليپازي بسيار بالا نسبت به سويه هاي معرفي‌شده در ساير تحقيقات، به‌عنوان سويه‌هاي بسيارمناسب و كارآمد جهت تصفيه زيستي پساب‌ها پيشنهاد مي گردد.