تهيه آنتي بادي پلي كلونال عليه پروتئين فعال كننده ي سلول هاي B

زمينه و هدف: پروتئين فعال ‌كننده ي سلول هاي B (BAFF) عضوي مهم از خانواده ي فاكتور نكروزدهنده تومورها مي باشد. بيان بيش از اندازه‌ ي اين پروتئين در برخي بيماري هاي خودايمني و سرطان ها مشاهده شده است بنابراين اين پروتئين مي ‌تواند به ‌عنوان يك نشانگر تشخيصي و نيز يك هدف درماني احتمالي مورد استفاده قرار گيرد. هدف مطالعه حاضر توليد پلي ‌كلونال آنتي‌ بادي شتري براي شناسايي بخش خارج ‌سلولي پروتئين BAFF مي‌ باشد. روش ‌ها: سازه ژني بياني حاوي بخش خارج ‌سلولي پروتئين BAFF انساني تهيه و به باكتري اشرشياكولي (E.coli BL21 (DE3)) منتقل شد. بيان اين پروتئين توسط ايزوپروپيل تيوگالاكتوزيد القاء و تخليص با استفاده از ستون كروماتوگرافي تمايلي -NTA نيكل انجام شد. پروتئين به صورت زيرجلدي در چند مرحله به همراه ادجوانت فروند به شتر تزريق شد. عملكرد آنتي‌ بادي هاي پلي ‌كلونال در شناسايي پروتئين BAFF سرم جدا شده شتر با تست هاي الايزا، وسترن بلاتينگ و فلوسايتومتري بررسي شد. يافته‌ها: ايمن‌ سازي شتر پس از تزريق پروتئين BAFF نوتركيب با استفاده از تست الايزا اثبات شد. تست هاي فلوسايتومتري وسترن بلات نشان داد كه آنتي ‌بادي پلي ‌كلونال حاصله قادر به شناسايي پروتئين در سطح سلول مي ‌باشد.نتيجه‌گيري: باتوجه به نتايج بدست آمده، آنتي‌ بادي پلي ‌كلونال حاصل از سرم شتر قادر به تشخيص و اتصال اختصاصي به پروتئين BAFF بوده و قابليت استفاده به ‌عنوان يك عامل تشخيصي و درماني را دارد. ‌