اثر كلريد ليتيوم بر بقاء و عملكرد سلولهاي گرانولوزاي انسان در محيط كشت

هدف: بررسي تاثير كلريد ليتيوم بر بقاي سلولهاي گرانولوزاي انسان و ميزان ترشح 17 بتااستراديول توسط اين سلولها در محيط كشت مواد و روشها: سلولهاي گرانولوزا از مايع فوليكولار بيماران تحت درمان IVF/ICSI گرفته شد. پس از جداسازي سلولهاي خوني، در چهار گروه كشت داده شد. در گروه كنترل سلولها به مدت دو هفته در محيطي كه حاوي DMEM/Ham’s, F12 (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium Nutrient Mixture F-12 Ham) همراه با ده درصد سرم FBS (fetal bovine serum) بود، كشت شدند و در گروه هاي تيمار سلولها در محيط مزبور همراه با دوزهاي متفاوت (1، 2 و 5 ميلي مولار) از كلريد ليتيوم (LiCl) تحت شرايط يكسان كشت داده شدند (گروههاي تيمار). سپس 24 ساعت قبل از آغاز آناليز براي القاي آپوپتوز، سرم از محيط كشت سلولها حذف شد. ميزان وقوع آپوپتوز در اين سلولها بوسيله روش رنگ آميزي فلوسايتومتري و روش (TdT mediated dUTP-biotin Nick TUNEL End Labelling) بررسي شد. همچنين 48 ساعت قبل از آناليز به محيط كشت هر دو گروه براي تحريك ترشح سلولها، هورمونهاي FSH و آندروستنديون افزوده، سپس محيط رويي سلولها براي سنجش ميزان ترشح 17 بتا استراديول جمع آوري و با روش (Radio RIA Immuno Assay) سنجيده شد. يافته ها: نتايج نشان داد كه ميزان آپوپتوز سلولهاي گرانولوزا كه در محيط كلريدليتيوم كشت داده شده بودند بيشتر از 50 درصد نسبت به گروه كنترل كاهش يافته است (p<0.05). نتيجه آناليز RIA نشان داد كه اگر چه ترشح 17 بتا استراديول توسط سلولها، با افزايش دوز كلريدليتيوم افزايش يافته است تفاوت آنها با گروه كنترل اختلاف معني داري ندارد. نتيجه گيري: از نتايج به دست آمده مي توان استنباط كرد كه كلريدليتيوم مي تواند در كاهش ميزان آپوپتوز سلولهاي گرانولوزا همچنين افزايش عملكرد اين سلولها دخيل باشد.