ارزيابي تاثير جايگزيني كدون‎هاي نادر با كدون‎هاي بهينه در ناحيه شروع ترجمه ژن فاكتور رشد فيبروبلاستي بازي انساني(hbfgf) بر ميزان بيان اين فاكتور در باكتري اشرشيا كلي

ميزان بيان پروتيين‎هاي نوتركيب در باكتري اشرشيا كلي تحت تاثير عوامل مختلفي قرار مي‎گيرد، يكي از مهم‎ترين عوامل، وجود كدون‎هاي نادر است. ديده شده است كه جايگزيني كدون ها در ناحيه شروع ترجمه ژن به شدت بر ميزان بيان پروتيين هاي خارجي درباكتري اشرشيا كلي تاثير مي گذارد. هدف از اين تحقيق ارزيابي تاثير جايگزيني كدون هاي نادر ناحيه شروع ترجمه ژن فاكتور رشد فيبروبلاستي بازي انساني(hbfgf) با كدون هاي بهينه، بر ميزان بيان اين فاكتور درباكتري اشرشيا كلي است .بدين منظور 5 كدون از كدون هاي نادر ناحيه شروع ترجمه با كدون هايي با فراواني بيشتر جايگزين شدند. ژن تغيير يافته در پلاسميد بياني ساب كلون شد و ساختار حاصل به داخل سه سويه از باكتري اشرشياكلي ترنسفورم شد . سويه هاي حامل پلاسميد نوتركيب جهت بيان پروتيين مورد نظر القا شدند. در پايان ميزان بيان اين فاكتور باا ستفاده از تكنيك هاي مختلف اندازه گيري و با ميزان بيان سويه هاي حامل پلاسميد داراي ژن وحشي مقايسه شد. تفاوت قابل توجهي در ميزان بيان ژن موتانت در مقايسه با ژن وحشي مشاهده شد . اين اختلاف فاحش مشاهده شده در ميزان بيان ژن موتانت و وحشي مويد تاثير تغييرات ناحيه شروع ترجمه بر ميزان بيان اين پروتيين نوتركيب درباكتري اشرشيا كلي بود به گونه اي كه حتي يك تغيير جزيي در تعداد كمي از كدون ها منجر به يك تغيير شديد در ميزان بيان فاكتور رشد فيبروبلاستي بازي انساني نوتركيب گرديد . در مجموع نتايج حاصل بيانگر نقش كليدي توالي نوكليوتيدي انتهاي N – ترمينال ژن hbfgf از طريق تاثير مستقيم آن بر ساختار دوم mRNA در ناحيه شروع ترجمه بود، بطوريكه تغييرات اعمال شده در اين توالي منجر به ايجاد ساختارهاي ثانويه پايدار درناحيه شروع ترجمه mRNA ودر نتيجه كاهش كارايي ترجمه اين پروتيين نوتركيب گرديد.