وجود جريان هاي پتاسيمي اصلاح كننده تاخيري در غشا سلول هاي بنيادي جنيني انسان

وجود جريان هاي پتاسيمي اصلاح كننده تاخيري در غشا سلول هاي بنيادي جنيني انسان

مقدمه: سلولهاي بنيادي جنيني انسان سلولهاي پرتواني هستند كه توان تكثير و تمايز به ساير رده هاي سلولي را دارا مي باشند. بسياري از ويژگيهاي اين سلولها، از جمله خصوصيات الكتروفيزيولوژيك آنها هنوز ناشناخته باقي مانده است. در اين مطالعه ويژگيهاي پاسيو غشا و نيز جريان هاي پتاسيمي رو به خارج مورد بررسي قرار گرفت. روش‌ها: رده سلولهاي بنيادي جنيني انسان (Royan H6) مورد مطالعه قرار گرفت. به منظور بررسي ويژگيهاي الكتروفيزيولوژيك اين سلول ها از تكنيك Whole cell patch clamp استفاده شد و جريان هاي يوني با دپلاريزه كردن سلول از ولتاژ 90- تا 50+ ميلي ولت ثبت شدند. براي بررسي فارماكولوژيك جريان هاي يوني ثبت شده داروهاي تترااتيل آمونيوم كلرايد و 4-آمينوپيريدين براي مهار كانالهاي پتاسيمي به كار برده شدند. يافته‌ها: پتانسيل استراحت در اين سلول ها 87/0 ± 66/8- ميلي ولت، مقاومت غشا 23/0 ± 94/11 مگااهم و ظرفيت خازني 55/0± 46/1 نانو فاراد مي باشد. با استفاده از روش كلمپ ولتاژي جريانهاي يوني رو به خارجي ثبت شدند كه با مثبت تر شدن ولتاژ، اندازه آنها افزايش يافت. كانالهاي وابسته به ولتاژ پتاسيمي به ويژه delayed rectifier (IKDr) در اين سلولها وجود دارند و توسط تترا اتيل آمونيوم نيز مهار شدند در حالي كه در حضور 4-آمينوپيريدين جريانهاي پتاسيمي رو به خارج مهار نشدند. اين كانالها فاقد خصوصيت inactivation بوده و جريان رو به خارج از طريق آنها در ولتاژ 60- ميلي ولت شروع مي شد. ميانگين ميزان هدايت (conductance) اين كانال ها در ولتاژ 60- ميلي ولت برابر با 45/0±81/11 پيكوزيمنس و در ولتاژ 50= ميلي ولت 97/10±40/141 پيكوزيمنس بود. هيچگونه جريان رو به داخلي در اين سلولها ثبت نگرديد. نتيجه‌گيري: اين نتايج پيشنهاد مي كند كه ويژگيهاي الكتروفيزيولوژيك سلولهاي بنيادي جنيني كاملا منحصر به فرد مي باشد. در اين سلولها جريانهاي پتاسيمي delayed rectifier (IKDr) كه حساس به تترااتيل آمونيوم هستند قابل ثبت است در حالي كه جريانهاي پتاسيمي نوع A كه حساس به 4-آمينوپيريدين مي باشند، در اين سلولها ثبت نشدند.