تعيين فراواني جهش‌هاي موتيف YMDD در بيماران هپاتيت B مزمن تحت درمان با لاميوودين

تعيين فراواني جهش‌هاي موتيف YMDD در بيماران هپاتيت B مزمن تحت درمان با لاميوودين

زمينه و هدف: لاميوودين اولين آنالوگ نوكليوزيدي است كه به‌منظور مداواي بيماران هپاتيت B مزمن به كار گرفته مي‌شود. اين دارو در مهار همانندسازي ويروس هپاتيت B و كاهش فعاليت بيماري موثر است. اما مهم‌ترين مشكلي كه در درمان با لاميوودين وجود دارد؛ پيدايش سويه‌هاي حاوي جهش مقاوم به لاميوودين در طول مداوا مي‌باشد كه در اين سويه‌هاي حاوي جهش، تغيير آمينو اسيدي در موتيف YMDD پليمراز ويروس رخ داده است. هدف اين مطالعه بررسي فراواني جهش‌هاي موتيف YMDD در بيماران هپاتيتB مزمن تحت درمان با لاميوودين مي‌باشد. روش بررسي: در اين مطالعه، 56 بيمار هپاتيت مزمن كه پيشتر اينترفرون و يا آنالوگ نوكليوزيدي/ نوكليوتيدي دريافت نكرده بودند و حداقل براي 6 ماه تحت درمان با لاميوودين قرار داشتند، بررسي شدند. ابتدا DNA ويروس هپاتيت B از سرم بيماران استخراج شد و جهش‌هاي موتيف YMDD در ژن پليمراز ويروس با استفاده از روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز (PCR)، سپس توالي‌يابي مستقيم محصول PCR، تعيين گرديد. ميزان ويروس هپاتيت B در سرم بيماران به روش PCR كمّي مشخص شد. يافته‌ها: 56 بيمار هپاتيت B مزمن (39 مرد و 17 زن) با ميانگين سني 6/13±12/34 سال بررسي شدند. در 15 بيمار (7/26%) از 56 بيمار، جهش‌هاي موتيف YMDDدر ژن پليمراز ويروس هپاتيت B مشاهده گرديد. جهش‌ها در 8 بيمار (2/14%) به‌صورت YIDD و در 7 بيمار (5/12%) به‌صورت YVDD بود. جهش سرين در موتيف YMDD در هيچ‌يك از بيماران اين مطالعه مشاهده نشد. نتيجه‌گيري: نتايج اين بررسي نشان داد فراواني جهش‌هاي موتيف YMDD كه منجر به مقاومت به داروي لاميوودين مي‌گردد، در بين بيماران هپاتيت B مزمن در كشور ايران متداول است (7/26%) و تشخيص مولكولي جهش‌هاي موتيف YMDD با استفاده از روش‌هايي مانند توالي‌يابي مستقيم DNA مي‌تواند رخداد مقاومت دارويي را در مراحل اوليه پيدايش در بيماران هپاتيتB مزمن تعيين كند.

Background and Objectives: Lamivudine is the first nucleoside analogue licensed for the treatment of chronic hepatitis B patients which is effective in suppressing virus replication and results in reduced disease activity. However the most important problem of lamivudine treatment is the emergence of lamivudine resistance strains with amino acid substitution in the YMDD motif of the DNA polymerase during the treatment. The aim of this study was to evaluate the frequency of YMDD motif mutations in chronic hepatitis B patients treated with lamivudine. Methods: 56 chronic hepatitis B patients who had not previously received interferon and/or a nucleoside/nucleotide analogue, received lamivudine for a minimum of 6 months were examined in this study. HBV DNA was extracted from serum samples, and YMDD mutations in the HBV DNA polymerase gene was determined using PCR-direct sequencing. HBV DNA quantification was determined using real-time PCR. Results: 56 patients 39 (69.6%) male and 17 (30.4%) female with mean age of 34.12±) 13.6 (were evaluated. YMDD motif mutations were observed in 15 out of 56 patients (26.7%). 8 of these mutations (14.2%) were in the form of YIDD and the remaining 7 (12.5%) in YVDD form. Serine mutation at YMDD motif was not found in this study. Conclusion: YMDD motif mutations leading to lamivudine resistance is common in our chronic hepatitis B patients. Molecular diagnosis of YMDD motif mutations using methods such as direct DNA sequencing can detect upcoming viral resistance in chronic hepatitis B patients.