مطالعه ماهيت ساختاري بيوپليمر مترشحه از يك گونه باسيلوس جدا شده از پساب صنعتي

مطالعه ماهيت ساختاري بيوپليمر مترشحه از يك گونه باسيلوس جدا شده از پساب صنعتي

تعدادي از سويه‌هاي باكتريايي، بيوپليمري توليد مي‌كنند كه داراي ساختار و خواص متفاوتي هستند. جهت شناسايي اين پليمر مترشحه از انواع حلال‌هاي آلي و آبي و نيز حلاليت نسبي آن در حلال‌هاي قطبي و غير قطبي استفاده گرديد. سپس با استفاده از روش‌هاي مختلف، حضور قند، ليپيد و پروتيين در پليمر مذكور مورد بررسي قرار گرفت. با استفاده از روش‌هاي استخراج به روش EDTA، هيدروكسيد سديم و رقيق‌سازي با آب مقطر بخشي از بيوپليمر به شكل پودر سفيدرنگ در آمدكه بيانگر ماهيت پلي ساكاريدي آن مي‌باشد. علاوه بر اين، نتيجه آزمايش Molish كه حضور قندها و پلي‌ساكاريدها را اثبات مي‌كند نيز مثبت بود. از طرفي مثبت بودن آزمايشات Dyer و Bligh نيز نشان‌دهنده حضور ليپيد در ساختمان بيوپليمر بود. بررسي بعدي از حيث حضور يا عدم حضور پروتيين در شبكه بيوپليمر انجام گرفت. بدين لحاظ ابتداي با استفاده از روش‌هاي اندازه‌گيري پروتيين نظير لوري و برادفورد، حضور پروتيين به اثبات رسيد. جهت بررسي بيشتر و نحوه حضور پروتيين‌ها در شبكه بيوپليمري، از روش‌هاي الكتروفورز و اسپكترو فتومتري UV-Vis بهره گرفته شد و با استفاده از روش SDS-PAGE و رنگ‌آميزي ژل با نيترات نقره مشخص شد پروتيين‌هاي مختلف با وزن مولكولي 66-12 كيلو دالتون در شبكه پليمري حضور دارند؛ اين در حالي است كه در ژل Native-PAGE هيچ‌گونه باند پروتييني ظاهر نشد. نتايج اسپكتروسكپي -Vis Uv نيز وجود جزي پروتييني را نشان نداد. اين نتايج دال برعدم بروز پروتيين‌ها در شبكه پليمري است و درگيري پروتيين‌ها در درون شبكه را به اثبات مي‌رساند كه به‌طور كلي، نتايج بيانگر ماهيت چندگانه اين پليمر بود

Several strains of bacterium produce a biopolymer with different properties. For studying this biopolymer, its relative solubility in organic and inorganic solvents was studied after harvesting it from bacillus culture. Then, using a variety of methods, the coexistence of lipids, sugars and proteins and other compounds in the biopolymer network was examined. Addition of EDTA, sodium hydroxide and dilution of biopolymer solution led to precipitation of some part of this biopolymer as white powder which indicated its polysaccharide properties. The coexistence of polysaccharide and lipids in biopolymer was consequently shown by Mulish and Dyer/or Bligh Test. Adoption of Lowry and Bradford methods showed that the biopolymer composition has been mixed with proteins. Further studies on these proteins were performed by Native & denaturing Electrophoresis & UV-Vis spectroscopy. The results of SDS-PAGE method showed small protein bands with 12-66 kDa in MW. The Native Electrophoresis results indicated that this protein can not run of Electrophoresis due to binding of polymer network by non-covalent bands. Furthermore, the UV-Vis spectroscopy of biopolymer did not show any protein peak. This result indicated that the proteins of biopolymer have been trapped in polymer network. In summary, the results show that this polymer has multi-substance Native.