بررسي تغييرات آنيوپلوييدي نيشكر در شرايط كشت بافت

بررسي تغييرات آنيوپلوييدي نيشكر در شرايط كشت بافت

به منظور بررسي تغييرات آنيوپلوييدي نيشكر(Saccharum officinarum L.) ، در شرايط كشت بافت، سترون سازي برگ هاي اوليه نيشكر واريته CP69-1062، با 6 تيمار در يك طرح كاملا تصادفي با 5 تكرار مورد بررسي قرار گرفت. تيمار هيپوكلريت سديم 20 درصد به مدت 10 دقيقه همراه با كلرورجيوه 1/0 درصد به مدت 3 دقيقه و 30 ثانيه، بهترين نتايج را در سترون سازي برگ هاي اوليه به همراه داشت. جهت كالوس زايي، 6 تيمار در يك طرح كاملا تصادفي با 4 تكرار ارزيابي شد. محيط MS پايه كه با 2,4-D به ميزان 5/2 ميلي گرم در ليتر تكميل شده بود، بهترين نتيجه را در القاي كالوس از برگ هاي اوليه دارا بود. باززايي كالوس ها در پنج تيمار در يك طرح كاملا تصادفي با پنج تكرار بررسي گرديد. محيط MS كه با 1 ميلي گرم در ليترBAP و 5/0 ميلي گرم در ليتر IBA تكميل شده بود و نيز محيط MS كه با 2 ميلي گرم در ليتر BAP به همراه 5/0 ميلي گرم در ليتر NAA تكميل شده بود، به عنوان بهترين تيمارهاي باززايي از كالوس‌هاي موجود معرفي شدند. ريشه زايي نوشاخه ها، در پنج تيمار در يك طرح كاملاً تصادفي با چهار تكرار مورد مطالعه قرار گرفت. محيط MS كه با 5/3 ميلي گرم در ليتر NAA تكميل شده بود، بعنوان بهترين تيمار ريشه زايي پيشنهاد گرديد. 45 روز پس از انتقال گياهك هاي باززايي شده به خاك (71% سازگاري)، مطالعات سيتوژنتيكي انجام شد. 5/32% گياهك هاي انتخابي، آنيوپلوييدي را در سلول هاي مريستمي ريشه نشان دادند.

In order to study of sugarcane (Saccharum officinarum L.) aniuploidy in vitro culture, disinfection of initial leaves of sugarcane variety CP69-1062 was studied using six treatments in a completely randomized design (CRD) with five replications. Sequential applications of 20% sodium hypochlorite for 10 minutes and 0.1% mercuric chloride for 3 minutes and 30 seconds had the best results on disinfection of initial leaves. Six callus induction treatments were evaluated through completely randomized design with four replications. Murashig and skoog (MS) based medium supplemented with 2.5 mgl-1 2,4-D had the best results for callus induction of initial leaves. Regeneration of calli was studied using five treatments in a completely randomized design with five replications. MS medium supplemented with 1 mgl-1 BAP and 0.5 mgl-1 IBA and also 2 mgl-1 BAP and 0.5 mgl-1 NAA were more efficient on regeneration. Root formation was studied using five treatments in a completely randomized design with four replications. MS medium supplemented with 3.5 mgl-1 NAA was found as the best for root induction treatment. Cytogenetics studies were performed 45 days after transmission of regenerants to the soil (71% acclimatization). 32.5% of selected plantlets demonstrated aniuploidy in their root meristemic cells.