بيان ژن‌هاي خودبازسازي Oct4 ، Nanog ، Sox2 ، Nucleostemin ، Bmi و Zfx در رده‌هاي سلولي سرطاني كولون(CaCo2 و HT-29) ، كبد(HepG2)، پروستات (LNCaP)، مثانه(HT-1376) و در نمونه‌هاي تومور انساني كولون، مثا

Evaluation of the expression of self renewal genes (Oct-4, Nanog, Sox2, Nucleostemin, Bmi and Zfx) in bladder, colon and prostate cancers and in cancer cell lines (LNCaP, HepG2, HT-29, CaCo2, HT-1376)

چكيده سابقه و هدف ژن‌هايي كه دركنترل خودبازسازي سلول‌هاي بنيادي نقش دارند به عنوان دسته جديدي از ماركرهاي مولكولي سرطان معرفي شده اند. در اين تحقيق، بيان ژن‌هاي Oct4 ،Sox2 ، Nanog ، Nucleostemin ، Zfxو Bmi-1 در رده‌هاي سلولي سرطان كولون، پروستات، كبد و مثانه هم چنين در نمونه‌هاي انساني اين سرطان‌ها مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‌ها در يك مطالعه تجربي، بيان ژن‌هاي خودبازسازي Oct4، Nanog ، Sox2 ، Nucleostemin ، Bmi ،Zfx با استفاده از روش RT-PCR در نمونه‌هاي تومور انساني شامل 10 نمونه تومور مثانه، 5 نمونه تومور پروستات، 5 نمونه تومور كولون و 5 نمونه نرمال كولون و در رده‌هاي سلولي سرطاني ارزيابي شد. هم چنين بيان ژن‌هاي Oct4 و Nucleostemin در سطح پروتيين با استفاده از روش ايمونوسيتوشيمي مورد مطالعه قرار گرفت. يافته‌ها نتايج نشان داد كه در نمونه‌هاي مورد مطالعه، ژن‌هاي خود بازسازي Oct4، Nanog، Sox2، Nucleostemin، Bmi و Zfxبيان مي‌شوند و اندازه باندهاي مربوط به ژن‌هاي مورد مطالعه مطابق با الگوي آغازگر طراحي شده بود. هم چنين بيان سيتوپلاسمي و هسته‌اي Oct4 و بيان هستكي و سيتوپلاسمي Nucleostemin با ارزيابي ايمونوسيتوشيمي تاييد شد. نتيجه گيري در جمعيت سلول‌هاي سرطاني مورد مطالعه مذكور، تعدادي از سلول‌ها ويژگي سلول‌هاي بنيادي سرطاني را دارند و به احتمال زياد در تكثير سلول‌هاي سرطاني نقش اصلي را بر عهده دارند كه به تاييد نظريه cancer stem cell كمك مي‌كند و پيشنهاد مي‌كند كه اين ژن‌ها به صورت بالقوه مي‌توانند به عنوان ماركر توموري جهت تشخيص و يا پيش‌آگهي سرطان استفاده شوند.

Background and Objectives Uncontrolled self renewal plays a direct function in different types of carcinoma progression. Here we examined the expression of self renewal regulatory factors such as Oct4, Nanog, Sox2, Nucleostemin, Zfx, Bmi-1 in colon, prostate, bladder and liver cancers in human samples and cancer cell lines. Materials and Methods We used RT-PCR to examine the expression of these genes in 10 tumors of bladder, 5 tumors of prostate, 5 tumors of colon , 5 normal tissues of colon, and cancer cell lines. The expression ofOct-4 and Nucleostemin at protein level was further determined by immunocytochemical (ICC) analysis in cancer cell lines. Results We designed specific primers to amplify a segment of Oct4, Nanog, Sox2, Nucleostemin, Bmi and Zfx. As expected DNA fragment of these genes based on designated primer was amplified in the PCR reaction. We detected the expression of these genes in almost all of the examined tumor samples and cancer cell lines that we used. Oct4 and Nucleostemin proteins were expressed in both nuclear and cytoplasmic in cancer cell lines. No immunoreactivity was observed in negative controls, which were incubated in the absence of primary antibody. . Conclusions Collectively, our results indicated that in a tumor population a rare subpopulation of cells -within the tumor cell mass has the potential of self renewal, and suggested that their expression can be used as potential tumor markers in diagnosis and/or prognosis of tumors. These results confirm the potential value of the cancer stem-cell theory in cancer therapy.