بررسي تاثير غلظت‌هاي مختلف CO2 در بيان ژن HSP70 در قارچ‌هاي درماتوفيت ترايكوفايتون روبروم و ميكروسپوروم كانيس

The Effect of Variable C02 Concentrations on HSP70 Gene in Trichophyton Rubrum and Microsporeum Canis

زمينه و هدف: ترايكوفايتون روبروم شايع‌ترين عامل درماتوفيتوزيس در پوست و ناخن انسان و ميكروسپوروم كانيس يكي از درماتوفيت‌هاي مهم حيوان دوست و قابل انتقال به انسان مي‌باشد و HSP70، يك پروتيين شوك حرارتي 70 كيلو دالتوني در قارچ‌ها است كه در اين مطالعه به بررسي تاثير غلظت‌هاي مختلف CO2 در بيان اين ژن در قارچ‌هاي مزبور پرداخته شده است. روش بررسي: نمونه‌هاي قارچي از تراشه‌هاي پوستي و ناخن بيماران مبتلا به كچلي ناخن جدا سازي و طبق روش‌هاي استاندارد اسپور نمونه‌ها‌ي مزبور ايزوله و در محيط سابورودكستروز مايع كشت داده شده و تحت تاثير غلظت‌هاي مختلف CO2(3، 5 و 10 درصد) در فاصله‌هاي زماني 2، 4 و 7 روزه و كشت‌هاي كنترل، بدون CO2 در فاصله زماني 7 روزه در دماي ثابت 25 درجه سانتي‌گراد انكوبه شدند. بيان ژن HSP70 در توده‌هاي مِيسليومي حاصل به‌روش RT-PCR در سطح mRNA مورد بررسي قرار گرفت و نتايج به‌دست آمده با ژن بتا اكتين مقايسه شدند. يافته‌ها: نتايج اين پژوهش نشان داد كه حداكثر تغييرات تحت غلظت‌هاي مختلف CO2(3، 5 و 10 درصد) در حداكثر فاصله زماني (7 روزه) بوده است و بيان ژن HSP70 تحت شرايط گفته شده نشان دهنده‌ي تغييرات متفاوتي در قارچ‌هاي مزبور مي‌باشد. نتيجه‌گيري: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان داد، بيان ژن HSP70 تحت تاثير غلظت‌هاي مختلف CO2در ترايكوفايتون روبروم نسبت به كنترل اثر كاهش دهنده‌ي (منفي) و در ميكروسپوروم كانيس نسبت به كنترل اثر افزاينده‌ي (مثبت) داشته است.

Background and Objectivs: Trichophyton rubrum is considered as the most common causes of dermatophytosis in human skin and nail tissues. Microsporeum canis is a zoophile dermatophyte which can be transmited to human. HSP70 is a 70 KD heat shock protein in fungi. In this study, the effects of variable C02 concentrations were examined on HSP70 expression in T. rubrum and M. canis. Materials and Methods: Strains used in this study were obtained from skin scales and nails of the patients who were suffering from onychomycosis. Samples were cultured on Sabouraud dextrose broth (SDB) and incubated at 25°C for 2, 4 and 7 days under 3%, 5%, and 10% of C02 concentrations. Control cultures maintained for 7 days without C02 concentrations. Then, RNA was isolated from the harvested mycelia mass, and HSP70 gene expression was studied in T. rubrum. and M. canis by RT-PCR. The obtained results were compared to the Beta actin as a house keeping gene. Results: The results of this study revealed the maximum variations under 3%,5%, and 10% of CO? concentrations in maximum 7 days incubation period, and the expression of HSP70 gene showed different variations under different CO? concentrations. Conclusion: Our results showed a negative effect of C02 concentrations in the expression of HSP70 in T. Rubrum and a positive effect in M. canis comparing to the controls.