جداسازي و شناسايي مولكولي مايكوپلاسما گالي سپتيكوم از بوقلمون‌هاي استان آذربايجان شرقي

جداسازي و شناسايي مولكولي مايكوپلاسما گالي سپتيكوم از بوقلمون‌هاي استان آذربايجان شرقي

مايكوپلاسما گالي سپتيكوم يكي از عوامل بيماريزاي مهم ماكيان و بوقلمون بوده كه خسارات اقتصادي فراواني به صنعت طيور وارد مي‌نمايد. هدف از اين تحقيق بررسي عفونت مايكوپلاسما گالي سپتيكوم در بوقلمون‌هاي استان آذربايجان شرقي از طريق آزمايشات سرولوژي، باكتري‌شناسي و مولكولي بود. تعداد 210 نمونه سرم و 210 عدد سوآب شكاف كامي حلقي (41 نمونه) از 41 گله پرورش بوقلمون جمع آوري گرديد. سرمها با استفاده از كيت استاندارد SINBIOTICS مورد آزمايش اليزا قرار گرفتند. نمونه‌هاي سوآب اخذ شده در محيط اختصاصي PPLO كشت داده شد. همچنين نمونه‌هاي مذكور بعداز استخراج DNA با استفاده از پرايمر اختصاصي جنس مايكوپلاسما و گونه مايكوپلاسما گالي سپتيكوم به ترتيب از نظر تكثير قطعات 163 و 500 جفت بازي بر روي ژن 16S rRNA مورد آزمايش PCR قرار گرفتند. نتايج حاصل از نمونه‌هاي سرمي نشان داد تعداد 2 گله (16 نمونه سرم) از نظر آنتي بادي MG در تست ELISA مثبت بودند. از 41 نمونه سواب مورد بررسي 2 نمونه (8/4%) در آزمايش PCR و 1 نمونه (4/2%) در كشت از نظر عفونت MG مثبت بودند. تعداد 26 نمونه (4/63%) از نظر PCR جنس مايكوپلاسما مثبت بود. از 2 گله آلوده به عفونت MG در PCR تنها در 1 گله ارگانيسم به وسيله كشت جداسازي شد. نتايج اين تحقيق علاوه بر اينكه وجود عفونت MG در گله‌هاي بوقلمون را براي اولين بار به اثبات مي‌رساند، سرعت، دقت و حساسيت بالاي روش‌هاي مولكولي در قياس با روش كشت را در تشخيص عفونت نشان مي‌دهد.

Mycoplasma gallisepticum is one of the pathogen factors of poultry and turkeys which cause financial loss in poultry industry. The aim of this research was to deal with MG infection via serological, bacteriological and molecular tests among turkeys in Eastern Azarbaijan. 210 sera and 210 choanal cleft swab (41 samples) were collected. Serums were examined based on ELISA test, using SYNBIOTICS standard Kit. Swab samples were cultured in PPLO medium. After DNA extraction, specific primers (Genus and Species) were examined for amplification of 163, 500 bp segment respectively upon 16S rRNA gene in the PCR test. Results showed 2 flocks (16 sera sample) were positive for MG antibody in ELISA. Concerning 41 swab samples, just two samples in PCR test (% 4/8) and one sample in culture were positive for MG. 26 samples regarding Mycoplasma Genus PCR were positive. One flock out of two MG infected turkey flocks in PCR test, only one was positive by culture. The results are suggestive of MG infection among turkeys for the first time, and represent the high sensitivity, accuracy and rapidity of molecular methods in comparison to culture.