اثر فاكتور رشد هپاتوسيت بر بلوغ آزمايشگاهي تخمك موش، لقاح و تكوين جنين هاي حاصل از آن

The effect of hepatocyte growth factor on mouse oocyte in vitro maturation and subsequent fertilization and embryo development

زمينه و هدف: بلوغ آزمايشگاهي تخمك يك روش مناسب در جهت درمان ناباروري مي باشد، كه استفاده كلينيكي آن به واسطه ي موفقيت پايين با محدوديت مواجه مي باشد. لذا اين مطالعه با هدف تاثير فاكتور رشد هپاتوسيت بر بلوغ آزمايشگاهي تخمك هاي نابالغ و تكوين جنين هاي حاصل از آن طراحي شده است. مواد و روش كار: مجموعه تخمك–كومولوس و وزيكول زاينده از 18 موش ماده 8-6 هفته اي نژاد NMRI، 48-46 ساعت به دنبال تزريق داخل صفاقي 5 واحد از PMSG (Pregnant Mares’ Serum Gonadotrophin) به دست آورده شد. تخمك ها در محيط Tissue culture medium-199 تيمار شده با دوزهاي صفر، ng/ml 10، ng/ml 20، ng/ml 50 وng/ml 100 از فاكتور رشد هپاتوسيت كشت داده شدند. بعد از 24 ساعت، تخمك ها در مرحله متافازII در مجاورت با اسپرم ها به مدت 6-4 ساعت در محيط T6 انكوبه شدند. تعداد تخمك ها و جنين ها با استفاده از ميكروسكوپ معكوس ثبت شد و ميزان بلوغ تخمك، لقاح و كليواژ جنين ها تا مرحله بلاستوسيست با استفاده از روش آماري 2? مقايسه گرديد. يافته ها: در همه گروه هاي مورد مطالعه، ميزان بلوغ تخمك ها و تكوين جنين ها در گروه تيمار شده با ng/ml20 از فاكتور رشد هپاتوسيت به طور معني داري بالاتر از گروه كنترل بود (05/0 > p). نتيجه گيري: ng/ml20 از فاكتور رشد هپاتوسيت در شرايط كشت، بلوغ تخمك و تكوين جنين ها را تا مرحله بلاستوسيست بهبود مي بخشد. م ت ع پ ز ،‌ 13(2): 30-26

Background: Oocyte invitro maturation is an enormously promising technology for the treatment of infertility, yet its clinical application remains limited owing to poor success rates. Therefore, this study was devised to evaluate the effect of hepatocyte growth factor (HGF) on in vitro maturation of immature mouse oocytes and resulting embryos development. Materials and Method: Cumulus - oocyte complex and germinal vesicle were obtained from eighteen 6-8 weeks-old female NMRI mice 46-48 hours after administration of an injection of 5 IU PMSG (Pregnant Mares Serum Gonadotropin). Oocytes were culture in TCM199 (Tissue culture medium-199) supplemented with dosages of 0, 10, 20, 50 and 100 ng/ml of HGF. After 24 hours, metaphase II oocytes were co-incubated with sperms for 4-6 hours in T6 medium. Following isolation of two pronucleus embryos, cleavage of embryos was assessed in the same medium till blastocyst stage. The number of oocytes and embryos was recorded under an invert microscope and the rate of oocyte maturation, fertilization and embryos cleavage until blastocyst stage compared using of student x2 test. Results: In all compared groups, oocytes growth and embryos development rate in the 20 ng/ml of HGF treatment group was significantly higher (p<0.05) than the control group (p<0.05). Conclusion: 20 ng/ml of HGF improved the nuclear maturation and embryo development up to blastocyst stage during culture condition. [ZJRMS, 13(2): 26-30]