اثرات ضد باكتريايي عصاره هاي اوكاليپتوس گلوبولوس بر روي بروسلا ملي تنسيس M16 و بروسلا آبورتوس S99 در شرايط آزمايشگاهي و مدل حيواني

اثرات ضد باكتريايي عصاره هاي اوكاليپتوس گلوبولوس بر روي بروسلا ملي تنسيس M16 و بروسلا آبورتوس S99 در شرايط آزمايشگاهي و مدل حيواني

زمينه و هدف: بروسلوزيس توسط پاتوژن هاي داخل سلولي از جنس بروسلا ايجاد مي شود كه مخزن طبيعي آن حيوانات خانگي و وحشي مي باشند. بررسي ها نشان مي دهند كه گياهان دارويي مي توانند با اطمينان و بطور موفقيت آميز در درمان بيماري هاي باكتريايي بدون بروز اثرات مضر و مقاومت هاي دارويي به كار برده شوند. روش كار: در اين مطالعه عصاره هاي آبي، اتانولي و استوني برگ هاي اوكاليپتوس تهيه شدند. سپس ميزان MIC و MBC عصاره ها براي بروسلا ملي تنسيس M16 و بروسلا آبورتوس S99 با روش هاي رقت در براث و انتشار چاهكي در آگار تعيين شد. در مطالعه مدل حيواني، ابتدا CFU/ml 5 × 10 5 باكتري بروسلا به صورت داخل صفاقي تزريق شد و بعد از 24 ساعت مقدار 0/5 سي سي (برابر با غلظت MBC عصاره ها) از عصاره هاي اوكاليپتوس به صورت داخل صفاقي به موش هاي ماده BALB/c تزريق شد. سپس طبق پروتكل هاي استاندارد تعداد كلوني هاي بروسلاي طحالي پس از 7 روز با كشت بر روي محيط مولر-هينتون آگار شمارش شد. يافته ها: نتايج نشان دادند كه MIC و MBC عصاره آبي اوكاليپتوس براي بروسلا ملي تنسيس M16 و بروسلا آبورتوس S99 به ترتيب، 1:80 (10/81 ميلي گرم بر ميلي ليتر) و 1:40 (21/62 ميلي گرم بر ميلي ليتر) و براي عصاره استوني 1:1280 (0/64 ميلي گرم بر ميلي ليتر) و 1:640 (1/29 ميلي گرم بر ميلي ليتر) و عصاره اتانولي 1:2560 (0/31 ميلي گرم بر ميلي ليتر) و 1:1280 (0/63 ميلي گرم بر ميلي ليتر) بودند. در رشد كرده در 48 ساعت پس از كشت سوپرناتانت طحالي براي عصاره هاي آبي، اتانولي و استوني به ترتيب 3 10 × 5 CFU/ml و 2 10 × 2 FU/ml و 2 10 × 6 CFU/ml در مقايسه با گروه كنترل 10 10 × 4 CFU/ml بودند. هم چنين نتايج آزمايشات in vivo براي بروسلا ابورتوس S99 براي عصاره هاي آبي، اتانولي و استوني به ترتيب 3 10 × 3 CFU/ml و 2 10 × 1 CFU/ml و 2 10 × 3 CFU/ml در مقايسه با گروه كنترل 9 10 × 9 CFU/ml بودند و اين نتايج كاهش معني دار (0/01 > P ) بروسلا را در تمام گروه هاي آزمون نشان دادند. نتيجه گيري: نتايج بررسي هاي شرايط آزمايشگاهي و مدل حيواني نشان داد كه عصاره هاي استوني و اتانولي اوكاليپتوس در مقايسه با عصاره آبي بيشترين فعاليت ضد ميكروبي موثر بر روي بروسلا ملي تنسيس M16 و بروسلا آبورتوس S99 دارند و مي توانند در درمان بروسلوز انساني و حيواني مفيد باشند.

Background & Objectives: Brucellosis is an infectious disease caused by intracellular pathogens of the genus Brucella that have their natural reservoir in domestic and wild animals. Many studies show that herbal medicines have been used safely and successfully to treat bacterial diseases without significant side effects and drug resistance problems. Methods: In this study aquatic, alcoholic and acetonic extracts of Eucalyptus globulus leaves were prepared, then MIC and MBC of extracts for B. melitensis 16M and B. abortus S99 were determined by broth macrodilution and agar well diffusion methods. In animal model study, 5×105 CFU/mL of Brucellae was injected intraperitoneally (i.p) to female BALB/c mice. After 24 hours, 0.5mL (equivalent MBC) of each Eucalyptus globulus extracts was injected (i.p) After 7 days, in spleen the colonies of brucellae were counted on Muller-Hinton agar as standard protocol. Results: The MIC and MBC of Eucalyptus globulus for B. melitensis M16 and B. abortus S99 were 1:80 (10.81 mg/mL) and 1:40 (21.62 mg/mL) for aquatic extract, 1:1280 (0.64 mg/mL) and 1:640 (1.29 mg/mL) for acetonic extract, and 1:2560 (0.31 mg/mL) and 1:1280 (0.63 mg/mL), for ethanolic extract respectively. In culture of spleen supernatant (in vivo), after 48 hours, the average grown B. melitensis 16M colonies for aquatic, ethanolic and acetonic extracts were 5×103 CFU/ml, 2×102 CFU/ml and 6×102 CFU/ml, respectively in comparison with control group (4×1010 CFU/ml). These results for B.abortus S99 were 3×103 CFU/ml, 1×102 CFU/ml and 3×102 CFU/ml, respectively in comparison with control group (9×109 CFU/ml) The results showed that bacterial load was significantly decreased in all experimental groups (p < 0.01). Conclusion: The results of in vitro and in vivo indicate that ethanolic and acetonic extracts of Eucalyptus globulus have more effective antimicrobial activity on B.melitensis M16 and B.abortus S99 than aquatic extract. It seems that the extracts Eucalyptus globulus can be used in treatment of human and animal brucellosis.