تعيين آلودگي آب مورد استفاده درسيستم خنك كننده لاشه طيور به باكتريهاي جنس سالمونلا و گونه‌هاي انتريتيديس و تايفي موريوم در كشتارگاه صنعتي شهرستان مشهد با استفاده از روش Multiplex-PCR

تعيين آلودگي آب مورد استفاده درسيستم خنك كننده لاشه طيور به باكتريهاي جنس سالمونلا و گونه‌هاي انتريتيديس و تايفي موريوم در كشتارگاه صنعتي شهرستان مشهد با استفاده از روش Multiplex-PCR

محصولات طيوربه عنوان يكي از مهمترين عوامل انتقال عفونت سالمونلايي در انسان شناخته شده است. آب مورد استفاده در قسمت پركني، پيش سردكن و سردكن(چيلر) در پروسه كشتار طيور مي‌تواند موجب انتقال متقابل باكتري‌ها گردد. آب پيش سرد كن و چيلر در پروسه كشتار طيور در مشهد به ترتيب هر 2و 5 ساعت يكبار تعويض مي‌گردد. در اين بررسي تعداد 52 نمونه، از آب منبع، آب پيش سردكن و چيلر كشتارگاه صنعتي طيور مشهد در ساعت‌هاي متوالي كاري باچهار تكرار در چهار روز برداشت گرديد و بااستفاده از روش كشت مرسوم شامل مراحل پيش غني سازي، غني سازي و كشت در محيط‌هاي اختصاصي و تفريقي، تعداد 10 نمونه آلوده به جنس سالمونلا تشخيص داده شد. تمامي موارد مثبت مربوط به نمونه آب چيلر، و بيشترين ميزان آلودگي مربوط به ساعت‌هاي انتهايي قبل از تعويض آب بود. جهت تاييد تشخيص كلني‌هاي جدا سازي شده به عنوان جنس سالمونلا و تعيين سرووارهاي تايفي موريوم و انتريتيديس، كلني‌هاي جداسازي شده به روش مولتي پلكس PCR با استفاده از سه جفت پرايمر شامل ‌141S و ‌138S اختصاصي ژن invA، پرايمر‌هاي ‌15Fli و Tym اختصاصي ژن‌fliC و پرايمر‌هاي ‌ 5e-6Prot و ‌ 6e-6Prot اختصاصي ژن E6Protكه به ترتيب اختصاصي جنس سالمونلا و سرووارهاي تايفي‌موريوم و انتريتيديس مي‌باشند مورد آناليز قرارگرفت، در اين بررسي 2/19درصد آلودگي به جنس سالمونلا، 9/1درصد به سالمونلا تايفي‌موريوم ‚8/5درصد به سالمونلا انتريتيديس و 5/11 درصدبه ساير سرووارها مشخص گرديد. با توجه به حضور گونه‌هاي بيماري‌ز‌ا در آب مورد استفاده در خط كشتار، استفاده از جريان متقابل آب و لاشه در چيلر و نيز استفاده از مواد ضدعفوني كننده توصيه مي‌گردد. ‌

Poultry products have been recognized as a major source of human illness caused by Salmonella serovars. The water content of pre-chiller and chiller in processing line could be the source of cross contamination. Water contents of pre-chillers and chillers, in Mashhad poultry abattoirs are regularly changed every 2 and 5 hours respectively. In this study, a total of 52 water samples were collected from the main tank, the pre-chiller, the initial and the final sections of the chiller in different hours and during four consecutive days. In order to isolate Salmonella spp., conventional culture method: including pre- enrichment, enrichment, selective plating and differential plating were performed. To confirm the identification of isolated colonies as Salmonella spp. and determining serovars as Typhimurium and Enteritidis serovars, a multiplex PCR (m-PCR) assay, using three pairs of primers were employed. S141 and S139 for InvA gene, specific for the genus of Salmonella, Fli15 and Tym for FliC gene, specific for Typhimurium serovar and Prot6e-5 and Prot6e-6 for Prot6E gene, specific for Enteritidis serovar. Number of ten samples (19.2 %) were determined as contaminated with Salmonella spp. All positive samples were from the source of water chiller and the highest rate of contamination was determined in the final hours before refilling of chiller water. In m-PCR assay, number of 1 (1.9%) of isolated colonies were confirmed as SalmonellaTyphimurium and number of 3 (5.8%) of isolated colonies were confirmed as Salmonella Enteritidis. Considering the presence of pathogenic bacteria in chiller water, using counter flow of water and using disinfectants are recommendable.