تشخيص آنتي ژن هاي ليشمانيا اينفنتوم در ادرار با استفاده از روش KAtex و مقايسه ي آن با روش هاي سرولوژي

Detection of Leishmania Infantun Antigens in Urinary Samples by KAtex and Its Comparison with Serological Methods

زمينه و هدف: ليشمانيوز احشايي حداقل در سه استان اردبيل، فارس و آذربايجان شرقي به صورت اندميك وجود دارد. بيماري در كشور ما از نوع مديترانه اي بوده و بيشتر كودكان را گرفتار مي سازد. بنابراين تشخيص اوليه و درمان به موقع بيماري مي تواند از مرگ و مير بالاي آن (95 درصد) جلوگيري نمايد. به دليل تهاجمي بودن روش بيوپسي از مغز استخوان و طحال و محدوديت ساير روش ها، تلاش هاي زيادي صورت گرفته تا از تست هاي ساده تر در تشخيص ليشمانيا اينفنتوم در كودكان استفاده شود. تست KAtex با شناسايي آنتي ژن ها در ادرار از جمله اين موارد است. هدف از اين تحقيق ارزيابي KAtex در تشخيص ليشمانيوز احشايي در مناطق اندميك و مقايسه ي آن با روش هاي سرولوژيك معمول (IFA, DAT, ELISA IgG & IgM) به منظور امكان جايگزيني با روش هاي مذكور مي باشد. روش تحقيق: اين مطالعه از نوع اپيدميولوژي توصيفي بوده و در مدت پانزده ماه در روستاهاي توابع شهرستان هاي اهر و كليبر استان آذربايجان شرقي كه بيماري در آن ها اندميك مي باشد، انجام شد. كيت KAtex براي تشخيص ليشمانيوز احشايي در 72 فرد اثبات شده و مشكوك به بيماري كالا آزار و براي يافتن افراد مبتلا در بين 313 كودك ساكن مناطق اندميك اهر و كليبر (آذربايجان شرقي) در شمال غرب ايران به كار گرفته شد. براي يافتن توافق تست ها و اندكس هاي اعتبار و اعتماد، نتايج تست KAtex با ديگر تست هاي سرولوژيك مقايسه شد. براي آناليز داده ها از روش هاي آماري kappa و McNemar استفاده شد. يافته ها: از 385 نمونه ي ادرار تعداد 38 نمونه (8/9 درصد) با تست KAtex مثبت بودند. تست سريع KAtex داراي حساسيت 7/77 درصد و ويژگي بالا (2/98 درصد) در تشخيص ليشمانيوز احشايي در انسان بود. بالاترين توافقKAtex با تست Elisa-IgM (834/0=kappa، 549/0=p) و پايين ترين توافق KAtex با تست DAT (400/0=kappa، 001/0p < ) بود. هم چنين اين تست هيچ گونه واكنش متقاطع با نمونه هاي ادرار بيماران مبتلا به سل، توكسوپلاسموز و بروسلوز نداشت. نتيجه گيري: تست KAtex سريع، غير تهاجمي و ساده است. در انجام آن به تخصص ويژه و دستگاه هاي پيچيده نياز نيست و مي تواند براي تشخيص ليشمانيوز احشايي در مناطق اندميك به كار گرفته شود. هم چنين چون اين تست قادر است بيماري حاد، تحت حاد و پس از عفونت را از هم افتراق دهد، نتايج آن مي تواند براي تشخيص موارد اثبات نشده ي ليشمانيوز احشايي، تكميل كننده ي DAT باشد.

Background and Aim: Visceral leishmaniasis is endemic at least in three provinces of our country, Iran, including Ardabil, Fars and East Azarbayejan. The disease is of Mediterranean type in Iran and affects mainly children. Therefore, the early diagnosis and treatment of this disease can prevent its high mortality (95%). Because of the invasion of bone marrow aspiration or biopsy and limitations in the others methods, several studies have been done to use simple tests for the diagnosis of Leishmania infantum in children that KAtex test to detect the urinary antigens is one of them. The aim of this study was to evaluate the efficiency of KAtex test in the diagnosis of visceral leishmaniasis and possible replacement with serological methods (IFA, DAT, Elisa IgG & IgM) in endemic areas. Materials and Methods: This was a cross-sectional, descriptive and epidemiologic study which was conducted in Ahar and Kalybar villages of East Azarbayejan as endemic areas. KAtex kit was used for diagnosis in 72 confirmed and historic Kala-azar patients and for case finding among 313 children in the endemic area of Kalibar & Ahar, East Azerbaijan province, the northwest of Iran. The results were also compared with serologic tests (DAT, IFA, and Elisa- IgG & IgM) to determine any possible agreement and validity & reliability indexes. Kappa and McNemar were used for data analysis. Results: From 385 of urinary samples, 38 (9.8%) were positive by KAtex test. The rapid KAtex test had sensitivity of 77.7% and quite specificity (98.2%) in the diagnosis of human visceral leishmaniasis. Highest and lowest agreements of KAtex test were with Elisa- IgM (kappa = 0.834, P= 0.549) and DAT (kappa=0.400, P < 0.001), respectively. Also, this test did not have any cross reaction with tuberculosis, toxoplasmosis and brucellosis patientsʹ urine samples. Conclusion: The KAtex test is rapid, non-invasive and simple. It does not require much expertise or elaborate equipment; and it can be used for the diagnosis of visceral leishmaniasis in remote endemic areas. Also, because KAtex discriminates between active diseases, sub-clinical and past infection, its results can complete DAT for the diagnosis of unconfirmed visceral leishmaniasis cases.