مرکز منطقه ای اطلاع رساني علوم و فناوري - اثر غلظت‌هاي مختلف گلوكز بر بلوغ تخمك كومولوس‌دار مدل گاوي، لقاح و تكوين پيش ازلانه گزيني آن درشرايط آزمايشگاه

چكيده فارسي :

سابقه و هدف: مواد مغذي و سوبستراهاي مختلف انرژي‌زا در محيط كشت مي‌توانند در بلوغ هسته‌اي و سيتوپلاسمي تخمك اثر بگذارند. در مورد تاثير گلوكز برروي بلوغ تخمك در محيط كشت و تكوين روياني بعدي آن، نظرات متناقضي وجود دارد. هدف از اين مطالعه تعيين اثر غلظت‌هاي مختلف گلوكز بر بلوغ تخمك كومولوس‌دار، لقاح و تكوين پيش از لانه‌گزيني آن در يك مدل گاوي است. مواد و روش‌ها: تخمدان‌هاي گاوي از يك كشتارگاه جمع‌آوري و به آزمايشگاه انتقال داده شدند. مجموعه تخمك كومولوس (1170 عدد) از فوليكول‌هايي (به قطر6-2 ميلي‌متر) آسپيره و به‌طور تصادفي در چهارگروه (سه‌گروه تجربي و يكي كنترل) تقسيم سپس در ديش‌هاي كشت ارگان حاوي يك ميلي‌ليتر محيط كشت بلوغ كشت داده شدند. به محيط‌هاي كشت بلوغ گروه‌هاي تجربي به‌ترتيب مقادير 3، 5/1، 1ميلي‌گرم در ميلي‌ليتر D- گلوكز اضافه شد و همه در انكوباتور 5/38 درجه سانتيگراد، دي‌اكسيدكربن 5 درصد و هواي 95 درصد با رطوبت بالا براي مدت 24 ساعت كشت داده شدند. 394 تخمك پس از كشت براي بررسي ميزان بلوغ به‌طور تصادفي فيكس و776 تخمك ديگر را براي بررسي ميزان ‌لقاح و تكوين روياني اوليه با اسپرم‌هاي ذوب شده گاو نر لقاح داده و بعد از 18 ساعت از لقاح، 387 تخمك (تخم فرضي) به منظور بررسي ميزان لقاح فيكس و 389 عدد ديگر در محيط‌هاي تكويني مشابه تا مرحله بلاستوسيست (روز هشتم بعد از لقاح) كشت داده شدند. نمونه‌ها با استريوميكروسكوپ مورد بررسي قرار گرفته و نتايج با آزمون كاي‌دو مورد تجزيه و تحليل قرار گرفتند. يافته‌ها: نتايج اين تحقيق نشان داد كه ميزان بلوغ تخمك‌ها در محيط‌هاي داراي گلوكز در مقايسه با گروه كنترل (به‌ترتيب82، 79 و80 درصد در مقابل گروه كنترل 55 درصد) به‌طور معناداري بيشتر بوده است (001/0P < ) گر چه ميزان لقاح تخمك‌ها در بين گروه‌هاي مختلف فرقي نداشت (به‌ترتيب57 ،54 و50 درصد در مقابل گروه كنترل 49 درصد)، اما ميزان تشكيل بلاستوسيست‌ها در گروه‌هاي مورد، به‌طور معناداري (01/0P < ) بيشتر از گروه كنترل بوده است (به‌ترتيب30 ، 33 و32 درصد در مقابل گروه كنترل 14درصد). نتيجه‌گيري: يافته‌هاي اين تحقيق نشان مي‌دهد كه گلوكز در محيط كشت بلوغ، در بلوغ تخمك كومولوس‌دار و تكوين روياني بعدي آن اثر مثبت دارد.