مطالعه جهش‌هاي مرتبط با مقاومت به ايزونيازيد در سويه‌هاي مايكوباكتريوم توبركولوزيس مراكز سل استان‌هاي اصفهان و تهران به‌روش (PCR-RFLP (84-1383

Study of Mutations Associated with Isoniazid-Resistance in Clinical Mycobacterium Tuberculosis Strains, Tehran and Isfahan Province Tuberculosis Centers by PCR and RFLP-Based Technique (2004-5)

سابقه و هدف: به‌رغم اينكه ايزونيازيد به‌عنوان موثرترين دارو براي از ميان‌بردن باسيل سل مطرح است، مقاومت به اين دارو به سهولت پديد مي‌آيد. جهش‌هايي كه در katG ، inhA وahpC روي مي‌دهد، در اغلب موارد عامل مقاومت به ايزونيازيد است. البته فراواني اين جهش‌ها در جمعيت‌ها، متفاوت است. هدف از اين مطالعه تعيين مشخصات مولكولي مقاومت به ايزونيازيد در سويه‌هاي مايكوباكتريوم توبركولوزيس‌ است كه مي‌تواند در تشخيص سريع مقاومت دارويي كاربرد وسيعي داشته باشد. مواد و روش‌ها: اين مطالعه به روش توصيفي- تحليلي انجام شد. وجود جهش در نواحي خاصي از ژن‌هاي katG ، inhA و ahpC در 32 سويه مقاوم به ايزونيازيدمايكوباكتريوم‌توبركولوزيس مراكز سل استان‌هاي‌اصفهان و تهران بررسي شد. براي تعيين جهش‌هاي كدون 315 ژن katG از تكنيك PCR-RFLP استفاده ‌شد و بدين‌منظور محصول 355 جفت‌بازي PCR با آنزيم‌هاي MspI وMspA1I برش داده شد. براي بررسي جهش ژن‌هاي inhA وahpC نيز از سكونسينگ استفاده شد. يافته‌ها: فراواني جهش در كدون 315 ژن (Ser?Thr) katG ،inhA و ahpC ايزوله هاي مقاوم به ايزونيازيد به‌ترتيب 9/71، 9/18 و2/6 در صد بود. يكي از ايزوله ها فاقد جهش در ژن‌هاي مورد مطالعه بود. نتيجه‌گيري: PCR-RFLP با استفاده از آنزيم MspI كه توانايي تشخيص جانشيني Ser315Thr را در katG دارد، مي‌تواند اكثر سويه‌هاي مقاوم به ايزونيازيد را كه داراي جهش دركدون 315 هستند، شناسايي نمايد. از نتايج اين مطالعه مي‌توان دريافت كه شناسايي جهش Ser315Thr در ژنkatG مي‌تواند يك روش غربال‌گري سريع را براي شناسايي ايزوله‌هاي مايكوباكتريوم توبركولوزيس مقاوم به ايزونيازيد جداشده در مراكز سل اصفهان و تهران فراهم آورد.