بررسي نقش متانول در القاي تشكيل آميلوييد در آپوالكل دهيدروژناز مخمر

On the role of methanol in amyloid formation induction in apo-yeast alcoholdehydrogenase

تشكيل آميلوييد در پروتيين هاي غير بيماري زا تحت تاثير برخي حلال هاي قابل امتزاج با آب مثل الكل ها كمتر مطالعه شده است . در تحقيق حاضر فرآيند تشكيل آميلوييد در آپوالكل دهيدروژناز مخمر(apo?-YADH)كه در اثر تخليه اتم روي ساختاري تهيه شده، در محيط آب-متانول ارزيابي گرديد.ايجاد آميلوييد به كمك معرفهاي Congo Red و Thioflavin T واستفاده از روش هاي طيف سنجي فلورسانس و دو رنگ نمايي دوراني مورد مطالعه قرار گرفت. تشكيل آميلوييد در apo?-YADHتابع غلظت متانول است و از ترتيب (%80 > %70 > %60 > %40 > %20) پيروي مي كند. روند تشكيل آميلوييد در آنزيم همراه با انتقال ساختار از حالت طبيعي (Native) به حالت غني از صفحات بتا (beta- sheet rich) است. مطالعات توسط طيف سنجي دو رنگ نمايي دوراني (far-UV CD)چنين تغييرات ساختاري در آنزيم را به خوبي تاييد نمود.

Amyloid formation in non disease proteins has little been studied. In the present study, to reveal the trend of amyloid formation in a typical protein, apo I- yeast alcohol dehydrogenase (apo I-YADH) which was obtained by removing of the structural zinc, was subjected to aqueous solution of methanol . Amyloid formation was evaluated by Congo red (CR) and thioflavin T staining method using fluorescence and CD spectroscopy. The amyloid-inducing aptitude of methanol showed a concentration dependent manner: 20% < 40% < 60% < 70% < 80%. The established amyloid formation monitored by spectroscopic studies, was ascribed to the conformational transition from native to the beta-sheet rich structure in the enzyme molecules.