بررسي سميَت سلولي ذرات نانوهيدروكسي آپاتيت بر سلول‌هاي فيبروبلاست رده L929

Evaluation of cytotoxicity of hydroxyapatite nanoparticles on L929 fibroblast cells

مقدمه و هدف: هيدروكسي آپاتيت(Ca10(PO4)6(OH)2)HA يكي از مهمترين بيوسراميك‌ها براي كاربردهاي پزشكي و دندانپزشكي است؛ ولي حلاليت پايين ذرات به كاهش اثر آن در ساخت استخوان osteoconductivity ) ) منجر شده است و درنتيجه، ذرات نانو هيدروكسي آپاتيت (Nano-HA) با داشتن سطح تماس بيشتر وحلاليت بالاتر نسبت‌بهHAمعمولي، مورد توجه بسياري ازمحققان به‌عنوان يك پيوند موثر و جديد استخواني واقع ‌شده‌است؛ اما مطالعات متعددي تناقض‌هايي را در زمينه ي سازگاري زيستي اين ذرات نشان دادند. هدف از مطالعه حاضر بررسي سميَت سلولي (Cytotoxicity) ذرات نانوهيدروكسي آپاتيت روي سلول‌هاي فيبروبلاست رده ي L929 است. مواد وروش‌ها: اين مطالعه به‌صورت تجربي انجام‌گرفت.پس از استريل نمودن ذرات Nano-HA آن را با غلظت‌هاي 15.75،32،65،125،250،500،1000،2000،4000،8000 ppm (Parts Per Million)تهيه‌كرده و روي 10000 سلول فيبروبلاست رده L929 اثر داده، در پايان، ميزان حيات سلول‌ها در زمان‌هاي 2 ، 24، 48 و 72 ساعت با استفاده ‌از تست MTT مورد ارزيابي قرار گرفت ؛ سپس در صد سميَت سلولي نسبت‌به گرود كنترل در هر غلطت و زمان محاسبه شد و داده‌هاي حاصل با تست ANOVA آناليزشد. يافته‌ها: نتايج نشان داد كه با افزايش غلظت و گذشت زمان فعاليت حياتي سلول‌ها كاهش يافته‌است؛ ولي اين كاهش از لحاظ آماري معني دار نبود(P > 0.05). نتيجه‌گيري: نتايج عدم خاصيت سميَت سلولي ذرات Nano-HAرا در مجاورت با سلول‌هاي فيبروبلاست رده L929 نشان داد.

Background and Objective: Hydroxyapatite (Ca10(PO4 )6(OH)2) is an important biomaterial in medical and dental applications. Due to low solubility of its particles, it has had little application in bone reformation. For this reason, nanohydroxyapatite (Nano-HA) with a higher surface area and higher solubility has attracted the attention of researchers as an effective strategy for bone grafting purposes. There have been controversies regarding biocompatibility of the latter particles. The purpose of this research was to evaluate the biocompatibility of nano-HA on L929 fibroblast cells. Materials and Methods: In this experimental study, nano-sized, rod- like hydroxyapatite particles sterilized, then L929 fibroblast cells were cultured on 96-well plate. Cells were exposed to nano-HA at the following concentrations: 15.75, 32, 65, 125, 250, 500, 1000, 2000, 4000, and 8000 ppm. Later, for measuring the cell toxicity of the material, MTT method was utilized to measure the absorption, which evaluated the viability of the cells for each concentration and time point. The statistical ANOVA test was used in this study. Results: Results of this study showed that although cell viability decreased by increasing concentration and time but ANOVA analyze indicated that there was no significant difference between the groups (p > 0.05). Conclusion: The results indicate that “Nano-HA" biomaterial has acceptable compatibility with L929 fibroblast cells.