تشخيص سرولوژيكي و مولكولي وتعيين فراواني ويروس A سيب‌زميني در مزارع استان كرمان

Serological and molecular detection and prevalence of Potato virus A (PVA) in Kerman province

به منظور تعيين پراكنش ويروس Aسيب‌زميني (PVA)، از مناطق عمده سيب‌زميني‌كاري استان كرمان بازديدو656 نمونه سيب‌زميني داراي علايم ويروسي جمع‌آوري گرديد. آلودگي نمونه‌ها با آزمون سرولوژيكي DAS-ELISA با استفاده از يك آنتي سرم چند همسانه اي اختصاصي تعيين شد. نتايج حاصل بيانگر گسترش وسيع اين ويروس (9 تا 8/62 درصد) در مزارع مورد مطالعه بود. PVA روي توتون رقم سامسون تكثير و بعد از جمع آوري برگ‌هاي توتون آلوده به ويروس، خالص ‌سازي نسبي (partial purification) روي آن انجام شد. با تزريق آموده نسبتا خالص به خرگوش، آنتي‌سرم چند همسانه‌اي تهيه شد. همچنين چند ميزبان افتراقي جهت تفكيك PVA از ويروس Yسيب‌زميني معرفي گرديد. در آزمون رديابي PVA با استفاده از روش RT-PCR، پس از بكار بردن آغازگرهاي اختصاصي، محصول bp 1065 و نيز يك محصول فرعي به وزن حدود bp 625 تكثيرشد.

Main potato growing areas were surveyed for the relative incidence of Potato virus A (PVA) in Kerman province, during April 2002 through September 2004. Totally 656 samples showing virus symptoms were collected and tested by DAS-ELISA using a PVA polyclonal antiserum. The results showed that PVA is widely distributed and the percentage of PVA- infected plant samples was between 9 and 62.8. The virus was propagated in Nicotiana tabacum L. cv. Samsun NN and partially purified. This preparation was injected into a rabbit. The dilution of 1/512 of obtained antiserum reacted with PVA infected plant sap in indirect ELISA. Five plant species were identified to differentiate PVA from PVY. In RT-PCR, the main segment (1065bp) of coat protein (CP) gene was amplified using specific primers.