بررسي سيتوتوكسيسيته ICD-85 (تركيب پپتيدي مشتق ازسم مار و عقرب) روي سلول سرطاني م‍يلوي‍يدي HL-60

سابقه و هدف: مطالعات قبلي روي ICD-85 (پپتيد مشتق از زهر مار و عقرب )كه توسط محققين موسسه سرم سازي رازي استخراج شده است، اثر مهاري اين تركيب را در گروه سلول هاي سرطاني پستان (MDA-MB 231) نشان داد. اين تحقيق به منظور روشن شدن مكانيسم اثر ICD-85 روي سلولهاي سرطاني HL-60 صورت گرفته است. روش بررسي: ابتدا سيتوتوكسيسيته ICD-85 روي سلول HL-60 توسط تست MTT تعيين شد و تغييرات مرفولوژيكي حاصل از ICD-85 در سلول هايي كه به مدت24 ساعت در معرض اين تركيب قرار گرفتند، زير ميكروسكوپ الكتروني مشاهده شد. سپس ميزان LDH آزاد شده در محيط سلو ل هايي كه تحت تاثير ICD-85 قرار گرفته بودند، اندازه گيري شد. يافته ها: مقدار IC50 پس از افزودن غلظت هاي مشخص از ICD-85 (40، 4، 4/0، 04/0، 004/0 تا ... 15-10 ×4 ميكروگرم در ميلي-ليتر) به مدت24 ساعت به سلول HL-60 برابر با 04/0 ميكروگرم در ميلي ليتر محاسبه شد. هم چنين اين سلول ها در مقايسه با سلول هاي كنترل كه در معرض ICD-85قرار نگرفته بودند، زير ميكروسكوپ الكتروني تغييرات قابل توجهي از جمله كوچك شدن نسبت هسته به سيتوپلاسم، جمع شدن سيتوپلاسم، متراكم شدن محتويات هسته اي، افزايش واكويول هاي سيتوپلاسمي، تشكيل اجسام آپوپتوتيك و تخريب ميتوكندري مشاهده شد. دراندازه گيري ميزان LDH هيچ تغيير معني داري در ميزان LDH آزاد شده در غلظت هاي مختلف سم در مقايسه با سلول كنترل مشاهده نشد. نتيجه گيري: تحقيق حاضر اثر ضد رشد تركيب ICD-85 روي سلول HL-60 را نشان داد

Background: Our previous studies revealed an inhibitory effect of ICD-85; a venom derived peptide has been extracted by researchers of Razi vaccine and serum research institute, on breast cancer cell line (MDA-MB231). The present study was undertaken to evaluate the anti proliferative effect of HL60 cells. Materials and methods: The effect of ICD-85 on proliferation of HL-60 cancer cells was determined using the MTT assay. A quantitative cytotoxicity assay based on the release of lactate dehydrogenase (LDH; EC 1.1.1.27) was performed 24 h after exposure to various concentrations of ICD-85. The morphological changes of ICD-85 treated HL-60 cancer cells were observed under electron microscope. Results: ICD-85 induced marked concentration inhibition of cancer cell proliferation with an IC50 value of 0.04µg/ml following 24 h incubation. Electron microscopic findings of ICD-85 treated cells showed nuclear material condensation, endoplasmic reticulum dilation, mitochondria swelling or degradation, increased cytoplasmic vacuoles, reduction or disappearance in cytoplasmic process and decreased nuclear/cytoplasmic ratio. LDH determination of cultured media of HL60 cells exposed to various concentration of ICD-85 revealed no significant changes in LDH levels compared with untreated cells. Conclusion: The results of present study indicated that ICD-85 inhibited the cancer cell proliferation by inducing apoptosis rather than necrosis.