بررسي چندشكلي ژن FecB در بزهاي نجدي و بومي استان خوزستان با روشPCR-RFLP

Determination of Polymorphism of FecB gene in Najdi and native goats of Khouzestan province by PCR-RFLP

ايران يكي از مهمترين مراكز پرورش بز و گوسفند است. بزهاي نجدي و بومي استان خوزستان از جمله بزهاي چندقلوزاي كشور هستند كه ميزان چندقلوزايي در بين آنها به ترتيب 46 و 20 درصد است. بررسي ها نشان مي دهد كه جهش ژن بورولا، يكي از ژن هاي بزرگ و تاثيرگذار بر ميزان تخمك گذاري و چندقلوزايي است. هدف از اين مطالعه بررسي وجود جهش ژن بورولا در بزهاي نجدي و بومي استان خوزستان است؛ بدين منظور از 100 راس بز با سابقه چندقلوزايي (50 راس نجدي و 50 راس بومي) خونگيري به عمل آمد و DNA خون آنها با روش اصلاح شده نمكي استخراج و با استفاده از ژل آگارز ارزيابي شد. جايگاه جهش ژن FecB با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي، تكثير يافت و محصولات به دست آمده (190 جفت باز) به وسيله ژل آگارز 2% بررسي شدند. پس از هضم محصولات PCR با آنزيم AvaII، چندشكلي ژن FecB بررسي گرديد. در افراد هموزيگوس باندهاي 160 و 30 جفت بازي مشاهده مي شود، درحالي كه در حاملين هتروزيگوت باندهاي 190، 160 و 30 جفت بازي ديده مي شود ولي اگر جهش ژن در گله نباشد فقط باندهاي 190 جفت بازي مشاهده خواهد شد. براساس نتايج به دست آمده تنها باندهاي 190 جفت بازي در گله هاي مورد مطالعه ديده شد؛ بنابراين چند شكلي ژن FecB در بزهاي نجدي و بومي استان خوزستان وجود ندارد و تنها آلل موجود در اين جمعيت ها از نوع هموزيگوت غالب و همه نمونه ها داراي ژنوتيپ ++ مي باشند. در نتيجه عامل چندقلوزايي در بزهاي نجدي و بومي استان خوزستان نمي تواند ژن FecB باشد، به همين دليل، مطالعات گسترد ه تري براي ارزيابي ژن هاي موثر بر چندقلوزايي و تعيين ژنوتيپ آنها نياز است.

Iran is one of the importanct centers for breeding sheep and goats.Najdi and native goats in Khouzestan province are one of those Iranian goats which have litter size and their average litter sizes are 46 and 26 percent respectively. It is reported that Booroola gene has additive for litter size and ovulation rate in goats. In this study 100 blood samples were collected of Najdi (50 goat) and Native goats (50 goats). DNA of blood samples was extracted by modi!ed salting out method. The DNA was evaluated by spectrophotometer and agarose gel. Site of mutation was ampli!ed using speci!c prim- ers and PCR product (190 bp bands) was determined by agarose gel electrophoresis, and then the products PCR were digested with AvaII enzyme. The homozygous carrier goats with FecB mutation (BB) have a 160 bp and 30 bp bands, the noncarriers (++) have a 190 bp bands, whereas heterozy- gotes (B+) have 160, 30 and 190 bp bands. Results "did not show any polymorphism for FecB gene in khouzestanian goats. All of goats were wild type (++) so mutation of FecB gene is not cause of proli!cacy in khouzestanian goats. Further research is required to evaluate fecundity gene and geno- typing of khouzestanian goats.