بررسي ميزان تاثير پوسته مغز پسته (Testa) در كاهش رشد قارچ Aspergillus flavus آفلاتوكسين زا و توليد آفلاتوكسين B1 در مغز ارقام مختلف پسته

The effect of Testa on Reduction of Aspergillus flavus Growth and Aflatoxin B1 Production in Pistachio Kernels of Different Cultivars

به منظور ارزيابي تاثير پوسته مغز پسته(Testa) دركاهش ميزان رشد قارچ A. flavus آفلاتوكسين زا و توليد آفلاتوكسين B1 ، ده رقم پسته در زمان برداشت پسته از مناطق مختلف كشور جمع آوري گرديد. قسمتي از پوسته مغز پسته بهمراه يك ميليمتر از لپه ها يا مغز پسته تراشيده شد. مقدار 20 گرم مغز پسته سالم و 20 گرم مغز پسته زخمي ، پس از ضدعفوني سطحي درون تشتكهاي جداگانه قرار داده شد (طرح كاملا تصادفي در سه تكرار).يك ميلي ليتر از سوسپانسيون اسپور قارچ Aspergillus flavus آفلاتوكسين زا (به غلظت 106×2 اسپور در ميلي ليتر) به هر يك از تشتكها اضافه و تشتكها درون ظروف پلاستيكي حاوي آب مقطر سترون (براي تامين رطوبت در حد اشباع ) در انكوباتور در دماي 26 درجه سانتي گراد نگهداري گرديد. 5/2 ،5 و 8 روز بعد از مايه زني، ميزان درصد رشد و كلونيزاسيون قارچ در روي مغز پسته سالم و زخمي ارقام مختلف اندازه گيري شد. آفلاتوكسين توليد شده در پسته هاي آلوده نيز به روش BF استخراج و با استفاده از روش كروماتوگرافي لايه نازك ( TLC ) و دانسيتومتر، ميزان كمي آفلاتوكسين B1 نمونه ها محاسبه گرديد. در پايان اختلاف ميانگين درصد كلونيزاسيون قارچ A. flavus بر روي پسته هاي سالم و زخمي ارقام مختلف توسط آزمون t-student مورد مقايسه قرار گرفت. نتايج بررسيهاي آماري نشان دهنده معني دار بودن اختلاف ميانگين درصد كلونيزاسيون و اسپورزايي قارچ بر روي مغز پسته هاي سالم در مقايسه با پسته هاي زخمي ارقام مختلف، در سطح 1درصد مي باشد. بررسيها نشان دادن كه اختلاف ميزان توليد آفلاتوكسينB1 در پسته هاي سالم و زخمي نيز در سطح 5درصد معني دار است. به عبارت ديگر در پسته هاي سالم ، پوسته مي تواند به عنوان سدفيزيكوشيمياي مقاوم در برابر نفوذ قارچ به داخل مغز پسته عمل كرده و باعث كاهش رشد و اسپورزايي قارچ و توليد آفلاتوكسينB1 در مقايسه با پسته هاي زخمي گردد.

In order to evaluate the effect of testa on reduction of fungal growth and aflatoxin B1 producthon, ten cultivars of pistachio were collected from different parts of pistachio belt i-e Rafsanjan, Damghan and Ghazvin of Iran. A section of testa and one mm of endosperm were scraped. 20 gr. of wounded kernels and 20 gr. of unwounded kernels were surface sterilized and then placed in petri dishes separately (completely randomized design in 3 replications). One ml of the spore suspension of aflatoxigenic Aspergillus flavus was added to each petri dish. (spore suspension was adjusted to contain 2×106 spore per ml ). The plates were placed over water in plastic boxes and these were then placed in an incubator at 26?C for 2.5, 5 and 8 days. After inoculation, growth rate and colonization of A. flavus on wounded and unwounded pistachio kernels in different cultivars were measured. Also aflatoxin content of inoculated kernels was extracted by BF method and estimated by TLC and densitometer. Average of A. flavus growth percentage on surface of wounded and unwounded kernels was compared with t-student test. The results of this research indicated a significant difference in fungus growth rate and aflatoxin B1 production between wounded and unwounded kernels of pistachio cultivars. In other words, testa in unwounded kernels could be considered as a resistant barrier against the fungus penetration into kernels and reduced A. flavus growth and aflatoxin B1 production as compared with wounded kernels.