بررسي جهش هاي ژن N-RAS در اطفال مبتلا به لوسمي لنفوبلاستيك حاد(ALL)

Detection of N-RAS gene mutations in codons 12,13 and 61 in patients with pediatric acute lymphoblastic leukemia

بحث و نتيجه گيري: نتايج بدست آمده در اين تحقيق از نظر فراواني جهش با آمار ارايه شده توسط ساير محققان تفاوت چنداني نداشت. مواد و روش ها: در اين مطالعه توصيفي 60 نفر كودك بيمار با تشخيص ALL ) 32نفر common-ALL، 20نفر preBALL ،6 نفر T-ALL و2 نفر BALL ( با طيف سني 11 ماهه تا 14 سال،شامل 40 نفر مذكر 20 نفر مونث از نظر جهش هاي ژن N-RAS در كدون هاي 12، 13 و 61 با روش PCR-RFLP مورد بررسي قرار گرفتند. يافته ها: جهش هاي N-RAS در 7/11% (60/7) بيماران شناسايي شد، بيشتر آنها مذكر و كمتر از5 سال بودند. فراواني كلي جهش ها در كدونهاي 12، 13 و 61 به ترتيب 3/8%، 3/3% و7/1% به دست آمد و بيشتر بيماران داراي جهش (4/71%) c-ALL بودند. مقدمه: لوسمي حاد شايعترين بدخيمي كودكان است. يكي از مهم ترين عوامل ايجاد كننده لوسمي لنفوبلاستيك حاد(Acute Lymphoblastic Leukemia) جهش هاي مربوط به پروتوانكوژنها و تبديل آنها به انكوژن ها مي باشد. از جمله اين پروتوانكوژنها، پروتوانكوژن N-RASاست. از آنجايي كه آماري از فراواني جهش اين ژن در كودكان ALL ايراني وجود نداشت بر آن شديم ميزان فراواني اين جهش را در تعدادي از اين بيماران بررسي و ارتباط اين جهش ها را با سن، جنس و نوع ALL بررسي نماييم.

Background: Acute leukemia is the prevalent malignancy in pediatrics. One of the most important causing factors of acute lymphoblastic leukemia is mutations of proto oncogenes and their chang in to oncogenes. Activation of N-RAS proto-oncogene due to point mutations plays a major role in ALL malignancy. Since there was no report on the frequency of N-RAS gene mutation in Iranian pediatric ALL patients, therefore we decided to determine its frequency and compare the results with age, sex and type of ALL. Materials and Methods: In this study, 60 pediatric ALL patients from Tehran Mahak hospital were screened for the mutations of N-RAS gene at codons 12 ,13 1nd 61.DNA was extracted from peripheral blood samples before the start of chemotherapy. The above mentioned codons were amplified by PCR and analyzed by restriction endonuclease enzymes. Results: We could detect mutations in 7 cases of 60(11.7%) patients. Most of the mutations were detected in males with an age less than 5 years old. The frequency of mutations for codons 12, 13 and 61 were 8.3%,3.3% and 1.7% respectively. Most of the mutations (71.4%) were found in c-ALL subtype. Conclusion: We detected mutations in 11.7% of our ALL patients. In general , frequency of the mutations that we found was in agreement with the results of other studies. However , to do study with more patients and wider range of age using a combination of PCR-RFLP and direct gene sequencing is highly recommended.