توليد و كنترل كيفي آواستين-DOTA-Sm153

Production and Quality Control of 153Sm-DOTA -Avastin

زمينه و هدف: راديوداروهاي بر پايه آنتي بادي، امروزه در تصويربرداري و راديوتراپي سرطان به شدت مورد توجه مي باشند و يك وسيله بي نظير براي انتقال اختصاصي راديونوكليدها به آنتي ژن هاي خاص در بافت بيمار فراهم مي كنند. آنتي بادي منوكلونال آواستين با اتصال به فاكتور رشد اپي درمال عروقي و خنثي نمودن آن، رگزايي القا شده در تومورها را متوقف مي نمايد. در اين تحقيق تركيب ذره بتا با آنتي بادي آواستين به عنوان اولين قدم در توليد يك راديوداروي جديد مورد بررسي قرار گرفت. روش كار: در ابتدا آنتي بادي آواستين تخليص گرديد. آنتي بادي پس از كونژوگاسيون با DOTA-NHS تازه تهيه شده با ساماريم كلرايد-Sm153 نشاندار گرديد. بازده نشاندارسازي و پايداري برون تني با استفاده از كروماتوگرافي لايه نازك اندازه گيري شد. براي بررسي آزمايش يكپارچگي (Integrity) ساختار آنتي بادي نشاندار شده از روش الكتروفورز پلي آكريل آميد در حضور سديم دودسيل سولفات (SDS-PAGE) استفاده شد. نحوه توزيع حياتي فراورده در موش هاي BALB/C، 2، 24، 48 و 72 ساعت پس از تزريق بررسي گرديد. يافته ها: بازده نشان دارسازي بيشتر از 98% بود. پايداري برون تني فراورده نشاندارشده در سرم تازه انساني پس از 120 ساعت 2±83% بود. در SDS-PAGE هيچ گونه شكستگي و قطعه شدني در آنتي بادي نشاندار شده رخ نداد. بالاترين درصد راديواكتيويته دز تزريق شده در هر گرم بافت (%ID/g)، در كبد، ريه ها و كليه مشاهده گرديد. نتيجه گيري: آنتي بادي منوكلونال آواستين عليه رگزايي، به طور موثر با ساماريم 153 نشاندار گرديد و مطالعه توزيع بيولوژيكي نشان داد كه داراي ويژگي بالايي براي تجمع در بافت هاي غني از رگ هاي خوني مي باشد.

Background & Objectives: Antibody-based radiopharmaceutical drugs are the great current interest in imaging and radiotherapy of cancers, and provide an important tool for target-specific delivery of radionuclides to specific antigens in the diseased tissues. The monoclonal antibody avastin binds, neutralizes VEGF (Vascular endothelial growth factor) and blocks VEGF-induced angiogenesis in tumor tissues. In this study, the complex of avastin and beta particle was investigated as a first step in the production of a radiopharmaceutical drug. Methods:Antibody of avastin was prepared and purified. The antibody was conjugated with freshly prepared DOTA-NHS and then labeled with 153Sm-samarium chloride (185 MBq). The efficiency and in vitro stability of antibody labeling were determined using thin layer chromatography. The integrity of the radiolabeled antibody was checked by SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate PolyAcrylamide Gel Electrophoresis) protocol. Biodistribution study of 153Sm-DOTA –Avastin was performed in BALB/c mice at 2, 24, 48 and 72 hours after injection. Results: The efficiency of antibody labeling was more than 98%. The in vitro stability of the labeled product in human serum after 120h was 83 ±2%. There was no fragmentation in the labeled antibody during SDS-PAGE protocol. The highest (%ID/g) was observed in the liver, lungs and kidneys. Conclusion: The monoclonal antibody avastin against angiogenesis was effectively radiolabeled with 153Sm. The Biodistribution study showed that it has a high specificity to accumulation in tissues with enriched blood vessels.