كاربرد PCR در تشخيص ويروس عامل بيماري مارك طيور ‌ (MDV)

Diagnosis of Marek´s disease virus (MDV) by PCR

بيمـاري مـارك MD(‌)‌يـك بيماري ويروسي است كه در اثر نفوذ و تكثير سلولهاي لنفوييد در اعصاب سطحي و برخي اندامهاي ديگر در پرندگان بروز مي‌كند و در واقـع يكي از بيماري‌هاي واگير متداول و مهم طيور محسوب مي‌شود. اين ويـروس بـا تضعيـف سيستـم ايمني، باعث مستعد شدن طيور در مقابل ديگر بيماري‌ها مي‌شود. هدف از اين مطالعه تشخيص ويروس عامل بيماري مارك به عنـوان يكـي از عـوامل ويروسي تومورزا در طيور با استفاده از واكنش PCR مي‌باشد. به منظور تشخيص و رديابي ويروس مارك، نمونه‌هاي بافت توموري از كشتارگاه‌هاي طيور استان چهارمحال و بختياري جمع آوري شد. پس از استخراج DNA از نمـونـه‌ها، واكنش PCR با استفاده از پرايمر‌هاي اختصاصي براي تكثير ژن A و پرايمر‌هاي رديف 132 جفت بازي تكرار شونده ويروس MDV انجـام شـد. سـرانجام محصولات PCR روي ژل آگارز 5/1 درصد الكتروفورز گرديد. نتايج نشان داد كه 86/62 درصد از مجموع 280 نمونه ندول پوستي مورد آزمايش، از لحاظ حضور ژن A ويروس مارك مثبت بودند. همچنين در40 درصد از نمونه‌ها نيز رديف 132 جفت بازي تكرار شونده تشخيص داده شد. از آنجا كه كليه نمونه‌هاي مورد آزمايش داراي علايم باليني آلودگي به مارك بودند، اما با توجه به تشخيص آلودگي 86/62 درصدي، به نظر مي‌رسد عوامل ديگري به جز ويروس مـارك نيز در ايجاد ضايعات توموري در طيور نقش دارند.‌‌

Marek´s disease (MD) is a viral disease caused by the penetration and proliferation of lymphoid cells in parietal nerves and some other organs of birds and in fact as is considered, one of the ordinary and important infectious diseases in poultry. MD viruses cause immunosuppression and predispose poultry to other infectious diseases. The purpose of this study was diagnosis of Marekʹs disease virus as one of the causative agents for visceral tumors in chickens using PCR. In order to perform this study, tumoral tissue sampling was collected from slaughter houses of Chaharmahal & Bakhtiari province. After DNA extraction from samples, Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed using specific primers detecting 132bp tandem repeat and antigen Agene of MDV. Finally electrophoresis of PCR products was done on 1.5% agarose gel. The results showed that 62.86% of the total 280 nodul skin samples, tested for the presence of A genes of mark´s disease, were positive. In 40% of samples, 132 bp tandem repeat was also indentified. Since all the samples were tested have clinical symptoms of Marek´s disease, but the diagnosis of 62.86 percent infection based on PCR, it seems to be that other factors, except the MDV, have a role in tumor lesions in poultry.