بررسي ساختار ژنتيكي جمعيت گاو ماهي خزري Eichwald,1831) Neogobius caspius) در حوضه جنوبي خزر به روش PCR-RFLP

Population Genetic Structure of Neogobius caspius (Eichwald, 1831) in the South Caspian Sea using PCR-RFLP Marker

گاوماهي خزري منبع غذايي مهمي در درياي خزر مي باشد. اين ماهي غذاي عمده ماهيان خاوياري را تشكيل مي دهد، بدين جهت ساختار ژنتيك جمعيت گاوماهي خزري با استفاده از روش PCR-RFLP مورد بررسي قرار گرفت. تعداد 135 نمونه گاو ماهي خزري از 3 منطقه در طول ساحل حوضه جنوبي درياي خزر كه شامل سواحل انزلي، چالوس و بندرتركمن مي‌باشد، جمع آوري گرديد. با استفاده از يك جفت پرايمر كه مربوط به توالي نوكليوتيدهاي مجموعه ژن سيتوكروم b، ژن هاي tRNA,2 و ناحيه D-loop ژنوم ميتوكندري كه از چند گونه ماهي بدست آمده بود، انتخاب و جهت PCR مورد استفاده قرار گرفت نتايج بدست آمده نشان داد كه محصول PCR حدود bp700 از نمونه ها بدست آمد كه جهت انجام آناليز RFLP از آنزيم هاي ALUI، ALW26، BSeNI، DraI، MboI، RsaI، TasI، HincII، BSURI، Bsh12851، HinII و BSu15I براي هضم محصول PCR استفاده شد. الگوهاي هضم آنزيمي با ژل پلي اكريل آميد و رنگ آميزي نيترات نقره مشاهده گرديد. اين الگوها براي تمام نمونه ها مشابه بود. بر اين اساس مي‌توان گفت كه پديده پلي مورفيسم با استفاده از آنزيم هاي فوق در گاوماهي خزري قابل مشاهده نبوده و جمعيتي قابل جداسازي تشخيص داده نشد.

Neogobius caspius is a small benthic fish that is native of the Caspian Sea. The importance of this fish is because of its role as a main food resource of the Sturgeon fish. The genetic diversity of N.caspius population in the Caspian Sea was studied using PCR-RFLP technique. A total of 135 samples of N.caspius were collected from costal line in the north Caspian Sea, including specimens from costal of Anzali and Chalus. Genomic DNA was extracted by phenol-chloroform method and then was amplified using a pair primer of cytochrom b gene, 2 tRNA gene and the control region sequences by a thermal cycler. R: D2(5ʹ-CCGGAGTATGTAGGGCATTCTCAC-3ʹ) F: CY1(5ʹ-YYTAACCRRGACYAATGACTTGA-3ʹ) 12 restriction enzyme were used to digest the target gene region including: AluI - Alw26I(BsmAI) - BSeNI(BSRI)- DraI- MboI- RsaI – TasI – HincII- BsuRI(HaeIII) - Bsh1285I - Hin1I- Bsu15I. Digested PCR products were observed by silver staining method followed by polyacrilamid gel electrophoresis (PAGE). The results showed the same pattern among the species. There was no polymorphism and no differentiation in population in the Neogobius caspius fish in the southern coast of Caspian Sea.