كنترل بيولوژيك قارچ Rhizocronia solani جدا شده از روي پسته و خصوصيت يابي ژن كيتيناز از موثرترين عامل بيوكنترل

Biological Control of Rhizocronia solani ( Pistachio Isolate) and Molecular Analysisof Chitinase Gene from the Best Bio-Control Agent

قارچ Rhizoctonia solaniيكي از مهمترين عوامل بيماري زاي خاك زي است كه داراي دامنه ميزباني بسيار وسيعي بوده و با ايجاد بيماري مرگ گياهچه و پوسيدگي ريشه و ساقه روي گياه پسته، خسارت قابل توجهي به اين محصول وارد مي سازد. با هدف به دست آوردن يك آنتاگونيست مولد كيتيناز عليه قارچ مذكور، غربالگري اكتينوميست هاي خاكزي مولد آنزيم كيتيناز با نمونه برداري از خاك هاي زراعي و باغي چند منطقه در استان كرمان انجام شد. از بين جدايه هاي مورد بررسي، جدايه استرپتومايسس 410 توانست به طور موثري از فعاليت اين قارچ هم در شرايط آزمايشگاهي و هم در شرايط گلخانه اي جلوگيري كند. در ادامه با طراحي آغازگر هاي اختصاصي، ژن كد كننده ي كيتيناز به طول 603 جفت باز جداسازي و پس از همسانه سازي در وكتور pTZ57R/T تعيين توالي و خصوصيت يابي گرديد. نتايج نشان داد كه اين ژن پروتييني به طول 200 اسيد آمينه با وزن مولكولي 9/21636 دالتون را كد مي كند. اين پروتيين تشابه زيادي را با كيتينازهاي خانواده 19 گليكوزيل هيدرولازها كه نقش اصلي را در ممانعت از رشد پاتوژن هاي گياهي دارند، نشان داد.

Rhizoctonia solani, the causal agent of damping-off, root rot and stem rot, is one of the most important phytopathogenes with a wide host range which causes significant reduction in yield of pistachio (Pistacia vera). In search for finding chitinolytic biocontrol agents, actinomycetes producing chitinase enzyme were isolated from agricultural soils of Sirch, Kerman province . From tested isolates, Streptomyces isolate 410 significantly reduced the incidence of disease. Chitinase gene (603 bp) was cloned, sequenced and characterized from this isolate. The results showed that nucleotides encoding 200 amino acids and molecular weight of 21636.9 Da. This protein had the high homology with the family 19 chitinases glycosyl hydrolases which have the major role in the defense response against phytopathogens.