مطالعه ي لكتين هيستوشيميايي قند هاي انتهايي گليكوكانژوگيت ها طي تكامل كليه در رت

Lectinhistochemistry Study of Glycoconjugate Terminal Sugars During Rat kidney Development

زمينه و هدف: فرآيند هاي تكاملي توسط واكنش هاي متقابل سلول به سلول و يا سلول با ماتريكس خارج سلولي ميانجيگري مي شود. از طرفي اين ميان كنش ها توسط مولكول هاي شيميايي تنظيم مي شود. در اين راستا مطالعه حاضر به منظور بررسي توزيع و تغييرات برخي از تركيبات قندي طي تكامل كليه در رت انجام گرفت. روش تحقيق: تعداد 30 سر جنين رت نژاد ويستار در روزهاي 14، 16 و 18 حاملگي در فرمالين فيكس و پس از پاساژ بافتي، در پارافين قالب گيري، و برش هايي به ضخامت 5 ميكرون تهيه و در مجاورت با لكتين هاي LTA،MPA وUEA-I كه با HRP كونژوگه شده بودند قرار گرفتند. سپس شدت رنگ مقاطع ميكروسكوپي براي هر لكتين در مراحل مختلف جنيني به روش كور تعيين، رتبه بندي و با استفاده از روش هاي آماري باهم مقايسه شدند و از نمونه هاي مورد نظر تصوير تهيه گرديد. يافته ها: نتايج نشان داد كه واكنش لكتين MPA با پودوسيت ها به تدريج با پيشرفت تكامل از روز 14 تا 18 افزايش يافت (05/0 > p). سلول هاي مزانشيمي در كليه هاي در حال تكامل در روز هاي 14 و 16 واكنش نشان دادند در حاليكه در روز 18 واكنشي مشاهده نشد (05/0 > p). واكنش متوسطي در مجاري جمع كننده ادرار در روز 16 مشاهده گرديد. واكنش لكتينUEA-I با سلول هاي مزانشيمي در روز هاي 14 و 16 متوسط و در روز 18 كم ارزيابي گرديد (05/0 > p). در حاليكه واكنش پودوسيت ها در روز 16 متوسط و در روز 18 واكنش مذكور كاهش يافت(05/0 > p). لوله هاي جمع كننده در روز 16 واكنش ضعيفي را نشان دادند. واكنش لكتين LTAبا لوله هاي پيچيده دور و نزديك و مجاري جمع كننده در روز 18 ضعيف ارزيابي گرديد. پودوسيت ها در هيچ يك از مراحل تكاملي مورد بررسي واكنشي را با لكتين مذكور بروز ندادند و سلول هاي مزانشيمي در روز 14 واكنش متوسطي را بروز دادند كه اين واكنش در روز هاي 16 و 18 ناپديد گرديد. نتيجه گيري: طبق يافته هاي اين پژوهش مي توان نتيجه گرفت كه بيان و تغييرات گليكوكونژوگيت ها با قند هاي انتهايي L-fuc(?1?4)GlcNAc ، Gal-(B1?3)-GalNAc و L-fuc(? 1?3)Gal(B 1-4l)Glc در طي تكامل كليه تنظيم شده است.

Background and Aim: Developmental processes are mediated by cell surface and extracellular matrix (ECM) interactions that are regulated by the molecular mechanism. The aim of this study was to determine Glycoconjugates terminal sugars distribution and the changes during kidney development in rats using Lectinhistochemical technique. Materials and Methods: Thirty Wistar Rat embryos at different stages from days 14 (E14) to 18 days of gestation were fixed in formalin, embedded in paraffin and cut into 5µm thickness sections serially. The sections were incubated with different HRP-lectins from Lotus tetragonolobus (LTA), Maclura pomifera (MPA) and Ulex europeus agglutinine (UEA-I). Staining intensity was determined by means of blind method and the sections were graded to compare different embryonic stages. Results: Our findings showed that the reactions of MPA with podocyts started at E14 and increased afterwards (p < 0.05). Mesenchymal cells reacted with MPA on E14, E 16 and disappeared at E18 (p < 0.05). Collecting duct reaction with MPA was moderate on E 16. Mesenchymal cells reaction with UEA-I was moderate on E14 to E16 but decreased on E18 (p < 0.05). A weak reaction was observed in collecting duct with UEA-I on E16. Proximal and distal tubules as well as collecting ducts showed a weak reaction with LTA in E18. No reaction was observed in Podocytes. Mesenchymal cells reacted on E14 but did not react on E16 and E18 with UEA-I lectin. Conclusion: According to the results, it is concluded that distributions and changes of glycoconjugates with terminal sugars L-Fuc (?2-4) GlcNAc, Gal (B1-3) GalNAc and L-fuc (? 1?3) Gal (B 1-4) Glc, are regulated during rat kidney development.