بررسي تنوع ژنتيكي قارچ‌هاي مرتبط با بيماري Escaانگور با استفاده از تكنيك RAPD-PCR در باغات انگور استان خراسان شمالي

Study on Genetic Variability in Fungi Associated with Esca Disease in North Khorasan Province Vineyards with RAPD-PCR

يكي از مهم‌ترين و مهلك ترين بيماري هاي قارچي مو، بيماري اسكا مي‌باشد. بيماري اسكا تحت عنوان زوال مو (سكته مو) نيز ناميده مي شود و معمولا انگورهاي با بيش از 10 سال سن را آلوده مي نمايد. نمونه برداري در طي سال‌هاي 1386 و 1387 از تاكستان هاي شهرستان‌هاي بجنورد و فاروج(خراسان شمالي) صورت گرفت و قارچ هاي parasiticum Phaeoacremonium، Phaeoacremonium aleophilum، Phaeomoniella chlamydospora و Fomitiporia mediterranea جداسازي گرديدند. جدايه هايي كه بيشترين تنوع را در خصوصيات ريخت شناسي داشتند انتخاب شده و چند شكلي DNA جدايه ها با استفاده از 10 آغازگر تصادفي RAPD-PCR مورد بررسي قرار گرفت. نتايج حاصل از آناليزRAPD در اين تحقيق نشان داد كه تنوع ژنتيكي قابل توجهي در بين گونه Fomitiporia mediterranea وجود دارد و تقريباً يكنواختي ژنتيكي در بين گونه Phaeomoniella chlamydospora مشاهده شد. همچنين به منظور مطالعه تفكيك بين سه جنس Phaeoacremonium، Phaeomoniella و Fomitiporia از ميان ده آغازگر مورد استفاده، پنج آغاز گر تصادفي انتخاب شدند. بر اساس نتايج آناليز كلاستر جدايه ها به چهار گروه ژنوتيپي تفكيك شدند . با توجه به نتايج اين آزمايش مي‌توان بيان كرد كه نشانگر RAPD-PCR پتانسيل نسبتا بالايي در تعيين تنوع ژنتيكي قارچ هاي مولد اسكاي مو دارد. اين اولين گزارش از تنوع ژنتيكي عوامل مولد اسكاي مو در ايران مي‌باشد.

One of the most important and elusive diseases of grapevine is Esca disease. Esca is a complex disease that comprises a combination of symptoms caused by various fungi including growth retardation, decrease in productivity and decline of the plant and usually affecting adult plants (8 to 10 years and older). The purpose of this research was to study the genetic variations of fungal agents associated with Esca disease in Khorasan province which was performed by using the molecular marker PAPD. Sampling carried out done from the grapevines of Bojnourd (North Khorasan) and Phaeoacremonium parasiticum, Phaeacremonium aleophilum, Phaeomoniella chlamydospora were isolated from wood brown decay while Fomitiporia mediterranea was isolated from wood white decay. The isolates with the most variability in morphology were selected and DNA polymorphism of the isolates was studied by RAPD-PCR. For this purpose after extracting DNA, RAPD _PCR was performed in 25 microliter reactions with 10 random primers. The results of RAPD analysis demonstrated that remarkable genetic variations existed in F. mediterranea while rather uniformity in Pa. chlamydosporare.. The results showed that RAPD-PCR technique have a great potential in determining genetic variations of the fungi associated with Esca disease. This is the first study of genetic variability in Iranian isolates of fungal agent of Esca using RAPD molecular markers in the populations of this species.