اندازه گيري آپوپتوز سلول هاي تك هسته‌اي خون محيطي، سطح سرمي فاكتور نكروز دهنده تومورآلفا و پذيرنده نوع يك آن در بيماران ايراني مبتلا به سپتي سمي و مقايسه آن با افراد سالم

Comparison of apoptosis, circulating levels of tumor necrosis factor- and tumor necrosis factor type-I receptor in Iranian patients with sepsis and normal controls

زمينه و هدف: گزارشات متعددي مبني بر اهميت نقش آپوپتوز در سندروم سپتي سمي وجود دارد. هدف از مطالعه حاضر بررسي ميزان آپوپتوز در PBMC، سطح TNF و پذيرنده نوع يك آن در افراد مبتلا به سپتي سمي و مقايسه آن با افراد سالم مي‌باشد. روش بررسي: اين تحقيق بر روي 22 فرد بيمار مبتلا به سپتي سمي انجام گرفت. پس از اخذ 6 سي سي خون در شرايط استريل، با استفاده از كيت اليزا ميزان TNF و TNFRI سرم بيماران بررسي گرديد. بلافاصله پس از جداسازي PBMC، ميزان آپوپتوز اين سلول ها بررسي گرديد(آپوپتوز در زمان صفر)؛ در ادامه با كشت اين سلول ها ميزان آپوپتوز خود به خودي و تاثير TNF نوتركيب بر ميزان آپوپتوز نيز بررسي گرديد. يافته‌ها: ميزان آپوپتوز در زمان صفر و ميزان آپوپتوز خود به خودي PBMC بيماران در مقايسه با افراد نرمال افزايش معني-داري داشته و نشان دهنده اين است كه سلول هاي ايمني در شرايط in vivo براي مرگ سلولي برنامه ريزي شده اند. ميزان آپوپتوز PBMC بيماران، تحت تاثير TNF نسبت به آپوپتوز خود به خودي آنها افزايش معني داري نداشت. بحث و نتيجه گيري: نتايج نشان دهنده اين است كه مسيرهاي مرگ ديگري غير از پذيرنده هاي مرگ، در امر آپوپتوز دخيلند. همچنين ميزان سرمي هر دو پروتيين TNF و TNFRI در اين بيماران بطور معني داري در مقايسه با افراد نرمال افزايش يافته و اين افزايش متناسب r=0.908 با يكديگر است و نشان دهنده نقش پروتكتيو TNFRI در مراحل ابتدايي بيماري است.

Background and Aim: The present study was designed to compare the cell death, circulating levels of tumor necrosis factor-? and tumor necrosis factor type-I receptor in Iranian patients with sepsis and normal controls. Materials and methods: Twenty-two patients with sepsis were included in this study. After blood collection, the serum circulating levels of TNF- and TNFRI measured with ELISA kits. The PBMCs isolated from blood samples and proportion of apoptotic cells measured by flowcytometry at the time of blood draws (0 time) and after 24-h incubation. PBMCs incubated at 37°C in culture (spontaneous apoptosis) and in the presence of rTNF that is capable of inducing apoptosis in activated T cells expressing the TNF family of receptors. Results: PBMCs obtained from the patients showed significantly higher (P < 0.001) proportion of apoptotic cells than PBMCs of controls at 0 time, indicated that a higher fraction of PBMCs were undergoing apoptosis in vivo in patients but not in controls. After 24-h incubation, spontaneous ex vivo apoptosis of PBMCs was nearly as high as that of TNF- induced apoptosis, indicating that activated T cells had been preprogrammed in vivo to die. Discussion and Conclusion: The circulating levels of both TNF- and TNFRI showed significantly higher in patients (P < 0.001) than controls and this increase is proportional (r=0.908) in both indicating that TNFRI may have a protective effect in the early stage of sepsis. Key words: Sepsis, Apoptosis, TNF, sTNFR1, PBMC, Cell Death