بررسي انواع محيط‌هاي غني كننده، انتخابي و افتراقي درجداسازي و شناسايي سالمونلا در مبتلايان به اسهال

Evaluation of Enrichment, Selective and Differential Media in Isolation and Identification of Salmonella Among Children with Diarrhe

زمينه و هدف: سالمونلوزيس يك گاستروانتريت ناشي از آلودگي به سروتايپ‌هاي سالمونلا و يكي از شايع‌ترين عفونت‌هاي غذايي در جهان مي‌باشد. هدف از اين تحقيق بهينه سازي روش‌هاي متداول در جداسازي سالمونلا از نمونه اسهال كودكان مي‌باشد. روش بررسي: از 100 كودك بيمار مبتلا به اسهال مراجعه كننده به مركز طبي كودكان تهران نمونه مدفوع تهيه گرديد. سپس از 3 روش غني سازي راپاپورت واسيلياديس براث(RV) و تتراتيونات براث(TT) در 42 درجه سانتي گراد و سلنيت سيستيين براث(SC) در 37 درجه سانتي گراد جهت غني سازي سالمونلا استفاده گرديد. پس از 24 ساعت از هر روش بر روي 6 محيط كروم آگار سالمونلا(CHROMagar Salmonella)، رامباخ آگار(RA)، گزيلوز- ليزين- دزوكسي كولات آگار(XLD)، هكتون انتريك آگار(HE)، سالمونلا شيگلا آگار(SS)، بريليانت گرين آگار(BG) تلقيح نموده شد. يافته‌ها: در مجموع 13 نمونه(13%) به عنوان سالمونلا شناسايي شدند. از اين تعداد تمامي 13 نمونه(100%) با استفاده از RV براث، 8 نمونه (5/61%) با SCبراث و 3 نمونه (23%) با TTبراث مثبت شدند. بالاترين ميزان جداسازي از تركيب محيط غني كننده RV براث و محيط كشت انتخابي RA آگار با نسبت100% بدست آمد و پايين‌ترين ميزان جداسازي از تركيب محيط غني كننده TT براث و محيط كشت انتخابيBG آگار با نسبت 4/15% بدست آمد. نتيجه‌گيري: مقايسه 3 محيط غني كننده و 6 محيط كشت انتخابي نشان داد كه تركيبRV براث و RA آگار براي جداسازي سالمونلا بسيار مناسب است.

Background and Aim: Salmonellosis is a gastroenteritis caused by different serotypes of Salmonella and is the most common type of food poisoning in the world. The purpose of this research study is to optimize the conventional method for the isolation of Salmonella SPP from the diarrheic specimens of children. Materials and Methods: Stool specimens were obtained from one hundred patients admitted to Childrenʹs Medical Center for diarrhea. The enrichment media were prepared by 3 methods: Rappaport Vassiliadis broth (RV), Tetrathionate broth (TT), and Selenite Cystine broth (SC). Then, for the isolation of Salmonella SPP, the enrichment methods RV and TT were used and incubated at 42° C, and SC at 37° C. After 24 hours of incubation, the enrichment samples were inoculated into the following 6 different media: Hektone Enteric agar (HE), Rambach agar (RA), CHROMagar Salmnella (CHROMagar Salmonella), Brilliant Green agar (BG), Salmonella-Shigella agar (SS), and Xylose–Lysine–Deoxycholate agar (XLD). Results: In total, 13 out of one hundred samples were identified as Salmonella SPP. All of these 13 Salmonella SPP samples (i. e., 100%) were positive on RV broth; the figures were 8 (61.5%) and 3 (23%) on SC and TT broths, respectively. The highest amount of isolation was found by the combination of RV broth and RA agar (100%). The lowest rate, however, was obtained by the combination of TT agar and BG broth (15.4%). Conclusion: The comparison results of 3 enrichment media and 6 selective media showed that the mixture of RV broth and RA agar would be very fine for the isolation of Salmonella SPP. Key words: Salmonella, Gastroenteritis, Isolation, Enrichment