تغييرات پروتييني گياه تراريخت توتون Nicotiana tabacum L. حامل Ri T-DNA در پاسخ به تيمار جيبرلين در مقايسه با شاهد

Protein Changes of Ri T-DNA Carrier Transgenic Nicotiana tabacum L. Plant in Response to GA3 Treatment Comprising with Control

هدف: تنظيم كنندگان رشد گياهي مي‌توانند تغييراتي در فرآيندهاي فيزيولوژيك اعمال نمايند. هدف از اين مطالعه، بررسي تاثير جيبرلين (GA3) بر پروتيين هاي محلول و الگوي الكتروفورزي پروتيين‌هاي ريشه و برگ گياهان تراريخت حامل Ri T-DNA داراي ساقه كوتاه توتون در مقايسه با شاهد مي باشد. مواد و روش‌ها: ابتدا تراريخت بودن گياه توتون (Nicotiana tabacum L.) رقم Wisconsinبا روش PCR مورد تاييد قرارگرفت. سپس گياهان غير تراريخت و تراريخت به مدت 4 هفته درون محيط كشت MS حاوي GA3 با غلظت هاي 0، 2/0 و 4/0 ميلي گرم در ليتر در شرايط درون شيشه كشت داده شدند. پروتيين محلول كل ريشه و برگ گياهان تراريخت و غير تراريخت تحت تيمار GA3 استخراج و اندازه گيري شد. همچنين الگوي الكتروفورزي پروتيين هاي ريشه و برگ اين گياهان با روش SDS-PAGE بررسي گرديد. نتايج: تراريخت بودن گياهان مورد آزمايش با استفاده از پرايمر ژن آنزيم بتاگلوكورونيداز (GUS) اثبات گرديد. بررسي پروتييني ريشه و برگ گياهان غير تراريخت و تراريخت تيمار شده با غلظت‌هاي مختلف جيبرلين نشان داد كه تيمار خارجي تاثير معني ‌داري در افزايش پروتيين‌هاي محلول كل ريشه و برگ گياهان غير تراريخت و تراريخت دارد. همچنين جيبرلين موجب افزايش بيان باندهاي پروتييني در الگوي الكتروفورزي پروتيين‌ها گرديد. ‍ نتيجه گيري: تصور مي شود جيبرلين خارجي، بيوسنتز پروتيين در ريشه و برگ‌ها را از طريق تاثير بر فرآيند هاي نسخه برداري و ترجمه القا مي كند. جيبرلين همچنين از فعاليت آنزيم هاي تجزيه كننده پروتيين ممانعت مي نمايد.

Aim: Plant growth regulators are able to change the physiological process. Aim of this study is studies of gibberellin (GA3) effects on soluble proteins and root and leaf protein banding profile of short stem Ri T-DNA carrier transgenic Nicotiana tabacum L. plant in comprising with control. Material and Methods: First, transformation of tobacco plant cv. Wisconsin was confirmed using PCR technique. Then transgenic and non transgenic plants were treated with 0, .2 .4 mg/l GA3 in MS media under in vitro culture for 4 weeks. Soluble proteins as well as SDS PAGE of root and leaves from transgenic and non transgenic plants treated with GA3 were investigated. Results: Transformation in transgenic plant was confirmed using GUS primers. Assessment of roots and leaves protein of transgenic and non transgenic treated with different concentrations of GA3 revealed that exogenous GA3 had significant impact on increasing of total root protein of root and leaf in both transgenic and non transgenic plants. Also GA3 increased the number of protein bands in electrophoresis pattern. Conclusion: It is believed that exogenous GA has an impact on root and leaf protein synthesis through transcription and translation processes and also inhibited the activity of protein degradation enzymes. Keywords: Gibberellin, Nicotiana tabacum, Protein pattern, Transgene