طرح تحليل تعدادي از mRNA هاي مادري مخصوص اووسيت در جنين تك سلولي موش

Degradation Pattern of Some Oocyte Specific mRNAs in One Cell Mouse Embryo

مقدمه و هدف: در طي مرحله رشد در اووژنز مقدار زيادي mRNA ساخته و در اووسيت ذخيره مي شود سپس نسخه برداري در طي تقسيم ميوز متوقف مي گردد. توقف نسخه برداري در مراحل اوليه جنيني تا قبل از شروع فعاليت ژنوم جنين ادامه دارد. بنابراين، اولين وقايع سلولي در طي امبريوژنز در پستانداران و گونه هاي ديگر جانوري به RNAها و پروتيين هاي مادري ذخيره شده در اووسيت وابسته است. يكي از راه هاي كنترل ترجمه mRNA هاي مادري ذخيره شده، تحليل آنهاست. هدف از اين مطالعه بررسي روند تحليل تعدادي از اين mRNA ها است. روش كار: اين بررسي از نوع تجربي مي باشد و در طي آن تعدادي از ژن هاي خاص اووسيت شامل ,H1oo,tPA c-mos و Gdf9 انتخاب شده وميزان نسبي اين نسخه ها در اووسيت(متافاز II) وجنين، 3، 6، 9 و 12 ساعت بعد از افزودن اسپرم و با استفاده از Real-time PCR اندازه گيري شد و با ميزان mRNAs Cyclin A2 و Hprt مورد مقايسه قرار گرفت. نتايج: نتايج مطالعه نشان مي دهد كه mRNA هاي خاص اووسيت داراي مقاومت كمي بوده و در جنين 12 ساعته تحليل رفته و از سيتوپلاسم سلول حذف مي شوند در حاليكه Cyclin A2 و Hprt در سلول باقي مي مانند. نتيجه نهايي: يافته هاي اين مطالعه نشان دهنده مقاومت متفاوت گروه هاي مختلف mRNA ها در اووسيت و جنين است.

Introduction & Objective: During oogenesis, mRNA is actively transcribed and accumulated in the growing oocytes, and then the transcription stops. Transcription silencing will continue during early embryonic stages at least up to the time when the embryonic genome is activated. Thus the earliest stages of embryogenesis in mammals and other animal species are depending on stored maternal RNAs and proteins. Degradation of maternal mRNAs is a way to control their translation. The aim of this study was investigation of the degradation pattern of some of these mRNAs. Materials & Methods: In this experimental study, some oocyte specific genes including H1oo, c-mos, tPA and Gdf9 were selected and relative amounts of these transcripts were examined in oocyte(metaphase II) and one-cell mouse embryos, 3, 6, 9 and 12 hours after insemination using Real-time PCR, and compared with Cyclin A2 and Hprt mRNAs. Results: The results showed that oocyte specific mRNAs had low stability and degraded in 12 hour embryo and excluded from oocyte cytoplasm while Cyclin A2 and Hprt mRNAs did not. Conclusion: These results indicated different stability of mRNAs in oocyte and embryo.